疼痛对人类的健康危害甚大。脊髓背角对伤害性信息的传递和调制发挥重要作用。星形胶质细胞在中枢神经系统中广泛分布,参与结构和功能维持、免疫反应以及神经疾病的发病等病理生理过程。研究表明,星形胶质细胞与疼痛有关,脊髓胶质细胞的激活是疼痛发生和持续的关键因素,同时与中枢痛觉过敏的产生与维持密切相关。以往研究已发现,疼痛的发生和维持与嘌呤类P2受体有关,嘌呤类P2Y受体参与伤害性信息传递。本实验室曾俊伟等已经证实,脊髓背角星形胶质细胞表达P2Y1受体,P2Y1受体激活能引起炎性致痛因子TNF-α的分泌增加。
　　 地塞米松作为临床常用的糖皮质激素,目前研究多集中于它抑制炎性因子分泌而产生镇痛作用,但机制尚不十分清楚。地塞米松能否通过介导P2Y1受体抑制脊髓背角星形胶质细胞TNF-α的分泌?需要进一步研究。本实验通过纯化培养大鼠脊髓背角星形胶质细胞,观察不同浓度地塞米松对其P2Y1受体表达的影响,及地塞米松对ADPβs激活后的背角星形胶质细胞P2Y1受体表达的影响,并通过其对TNF-α分泌的改变推测可能的机制。
　　 方法:培养并纯化大鼠脊髓背角星形胶质细胞,免疫组织化学观察背角星形胶质细胞P2Y1受体表达水平的变化;ELISA技术检测背角星形胶质细胞TNF-α的分泌。
　　 结果:
　　 第一部分:
　　 1.大鼠脊髓背角星形胶质细胞的培养与纯化,免疫组织化学鉴定细胞类型。结果表明,脊髓背角星形胶质细胞纯度在98％以上。
　　 2.地塞米松呈剂量依赖性抑制脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体的表达;糖皮质激素受体阻断剂(RU486)特异性阻断糖皮质激素受体后,可拮抗地塞米松对背角星形胶质细胞P2Y1受体表达的抑制作用。
　　 3.地塞米松呈剂量依赖性抑制脊髓背角星形胶质细胞TNF-α的分泌。RU486特异性阻断糖皮质激素受体后,可拮抗地塞米松对脊髓背角星形胶质细胞TNF-α分泌的抑制作用。
　　 第二部分:
　　 1.ADPβs激活脊髓背角星形胶质细胞,呈剂量依赖性上调P2Y1受体的表达,在终浓度为100μmol/L,时P2Y1受体表达最多,并促进背角星形胶质细胞TNF-α分泌;P2Y1受体阻断剂(MRS2179)特异性阻断P2Y1受体后,可拮抗ADPβs对P2Y1受体表达及TNF-α分泌的促进作用。
　　 2.ADPβs激活脊髓背角星形胶质细胞,不同浓度地塞米松可呈剂量依赖性的拮抗ADPβs对背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF-α分泌的促进作用。
　　 结论:
　　 1.地塞米松对脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF-α的分泌均有抑制作用。
　　 2.ADPβs激活背角星形胶质细胞可以使P2Y1受体表达上调。
　　 3.地塞米松可抑制激活的脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体的表达及TNF-α的分泌。
　　 综上所述,地塞米松可能通过抑制P2Y1受体表达和TNF-α的分泌起到提高痛阈的作用;亦可能通过介导P2Y1受体抑制炎性因子TNF-α的分泌,说明地塞米松在疼痛状态下起到了镇痛作用。