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非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染猪科动物可以引起非洲猪瘟(African swine fever,ASF)。ASF是一种急热高度接触性传染病。病程短,发病死亡率高,家猪感染十天内病死率接近100%。我国辽宁省沈阳市于2018年8月发现首例非洲猪瘟病例。非洲猪瘟病毒在国内的蔓延对生猪养殖业、猪肉产品贸易及相关领域造成较为严重的经济冲击,但目前尚无有效商品化疫苗问世。ASFV基因编码150-200种蛋白质,其中约一半的ASFV蛋白功能尚不清楚,蛋白结构的解析对研究蛋白功能,作用结合位点,以及相关疫苗药物的开发,均有重要意义。目前大多数的ASFV蛋白的结构信息尚未可知,截至2020年5月PDB数据库显示八种ASFV蛋白(p B119L、A179L、A238L、NP419L、p A104R、p S273R、E165R、B646L)的三十余种形态被解析,其中半数以上的蛋白结构为近一年的研究结果。本课题利用荧光检测分子筛(FSEC)技术对ASFV推测具有较为关键功能的蛋白CP123L、X69R、EP152R、E199L、E66L、E183L、I329L、B475L、C84L、C217R、E248R、KR177R、MGF110-1L、B169L、O61R、EST-B在哺乳动物表达体系下进行筛选表达,发现表达水平良好的CP123L、B475L、KR177R、E199L、E248R。在优化B475L、KR177R蛋白的表达纯化后。能够获得高纯度的MBP-B475L融合蛋白、无标签KR177R蛋白和带有组氨酸标签的KR177R蛋白。对高纯度带有组氨酸标签的KR177R蛋白进行结晶筛选,获得六边形晶体。对KR177R蛋白晶体的获得,可以进一步利用X-射线衍射法进行结构解析。对非洲猪瘟病毒KR177R结构蛋白结构的解析将对相关机理功能的探究、侵染靶点的确定、相关亚疫苗的开发均有积极的作用。对B475L蛋白的表达纯化优化,及其他ASFV蛋白的筛选也为ASFV功能机制的研究提供一定的思路。