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目的:检测胃癌组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因、术前外周血清、胃液中基质金属蛋白酶表达水平,探讨组织中MMP-9基因表达水平与外周蛋白含量之间的关系;比较胃癌、肿瘤远端、正常对照胃组织之间MMP-9基因及蛋白表达差异;比较胃癌组与对照组之间术前外周血清、胃液蛋白水平差异;分析胃癌患者基质金属蛋白酶-9表达与肿瘤临床病理特征之间相关性。方法:收集于2005年6月至2005年12月期间在汕头大学医学院第一附属医院外科诊治的胃癌病例45例,采集各项检测指标,进行实验检测及分析。1)术前抽取患者外周静脉血,分离出血清后通过酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测术前外周血清中MMP-9蛋白水平。2)术前经鼻胃管吸取胃液,胃液经缓冲液中和及离心后,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测胃癌患者术前胃液中MMP-9蛋白水平。3)剪取胃癌手术切除后的新鲜胃癌及远端胃组织块,组织块经TRIZOL液提取组织总RNA,逆转录为cDNA后,进行聚合酶链式反应,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳分离,电泳条带在数码凝胶图像处理系统下观察并拍照、记录、分析结果并送基因测序分析产物特异性。4)应用免疫组织化学(IHC)二步法检测胃癌组织、远端组织、正常对照组织中MMP-9蛋白表达阳性率。结果:1)胃癌组织95.6%(43/45)阳性表达基质金属蛋白酶-9基因,mRNA平均灰度值为0.61±0.6;远端胃组织40%(18/45)阳性表达基因,mRNA平均灰度值为0.44±0.44,二者差别无统计学意义(P>0.05);正常对照组织10%(1/10)阳性表达MMP-9基因,mRNA平均灰度值0.03±0.06;胃癌组、远端组、对照组相互比较,前二者表达量均显著高于对照组MMP-9基因表达量(P<0.01)。2)免疫组织化学法检测胃癌组织86.7%(39/45)金属基质蛋白酶-9蛋白表达阳性,远端胃组织中26.7%(12/45)蛋白表达阳性,二者差别有统计学意义(P<0.01);而与正常对照组织10%(1/10)比较,肿瘤组表达量显著高于正常对照组MMP-9表达阳性率(P<0.01),蛋白染色阳性率与肿瘤侵犯浆膜层相关(P<0.05)。3)胃癌组及对照组病例均可于血清中测及MMP-9蛋白分泌,胃癌组血清中金属蛋白酶平均水平为406.03±257.18 ng/ml,显著高于对照组的167.35±54.04 ng/ml(P<0.01);TNM晚期、淋巴结转移阳性者术前外周血清蛋白含量显著高于TNM早期、淋巴结转移阴性者(P<0.01)。4)MMP-9蛋白可于46.7%(21/45)胃癌组术前胃液中测及,平均水平为77.59±191.97ng/ml;对照组可于10%(1/10)测及MMP-9蛋白,蛋白平均水平为0.81±2.39ng/ml,胃癌组蛋白水平显著高于对照组(P<0.01);肿瘤侵犯至浆膜层、TNM晚期、淋巴结转移阳性者蛋白含量显著高于肿瘤未侵犯至浆膜层、TNM早期、淋巴结转移阴性者(P<0.01)。5)肿瘤组织中基因表达与外周蛋白含量相关分析,肿瘤组织基因表达与术前胃液中蛋白含量呈显著性相关(r=0.366,P<0.05);而与术前外周血清中蛋白含量无相关性(P>0.05)。6)肿瘤家族史阴阳性组间MMP-9表达无显著性差异(P>0.05);未发现胃癌中不同血型与MMP-9表达有相关性(P>0.05)。结论:1)胃癌患者机体可能存在着MMP-9基因的异常活化及表达,检测组织中基因表达对肿瘤诊断具有一定意义。2)检测胃癌组织中蛋白表达情况对肿瘤诊断及恶性程度判断具有一定意义。3)检测胃癌患者术前血清中蛋白酶水平能更好反映肿瘤进展,对临床肿瘤病情评估及制定个体化治疗方案起指导意义。4)检测胃癌患者术前胃液中蛋白酶水平能更好地反映肿瘤进展,对临床肿瘤病情评估及制定个体化治疗方案起指导意义,检测胃液中蛋白酶含量为胃癌病情评估提供了无创的评估手段。5)测定术前胃液中蛋白含量可一定程度上反映胃癌患者肿瘤组织中的基因表达程度,为胃癌组织中MMP-9基因表达提供间接评估手段。6)肿瘤家族史在胃癌中对MMP-9的表达无明显影响;胃癌中血型对MMP-9的表达无明显影响。