热毒血瘀状态Balb/c小鼠C26人工血行肺转移模型研究

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目的:  建立具有中医热毒血瘀状态且合并C26结肠癌人工血行转移的Balb/c小鼠复合模型,并研究在这一复合模型中C26结肠移植瘤的生长及转移情况及其相关机制。  方法:  将36只8周龄雌性Balb/c小鼠6只为一组随机分为A、B、C、D、C’、D’六组。A组为空白对照组,隔天注射一次无热源生理盐水0.1ml;B组为热毒血瘀组,以4mg/kg的剂量隔天注射一次 LPS溶液;C组为单纯荷瘤组,隔天注射一次无热源生理盐水0.1ml,2周后尾静脉接种C26单细胞悬液(密度=4×106个/ml)0.1ml,24h后复予隔天注射一次无热源生理盐水0.1ml;D组为复合造模组,以4mg/kg的剂量隔天注射一次LPS溶液,2周后尾静脉接种C26单细胞悬液(密度=4×106个/ml)0.1ml,24h后复予4mg/kg的剂量隔天注射一次LPS溶液,持续4周。C’组为荷瘤生存期组,造模方法同单纯荷瘤组,4周后停止造模,用于生存期检测;D’组为复合生存期组,造模方法同复合造模组,4周后停止造模,用于生存期检测。第4周处死A、B、C、D组的小鼠,检测全血粘度,VEGF、ERK1/2、JNK1/2、MMP-2及MMP-12的表达。对C’、D’两组小鼠进行生存期观测。  结果:  ①热毒血瘀造模后小鼠发热症状明显,体重增加速度减缓,B组与A组比较差异有显著性(P<0.05)。  ②B组及D组全血粘度升高明显,与A组比较差异极显著(P<0.01)。  ③C组右肺转移灶数目多于D组,差异有显著性(P<0.05)。  ④C组生存期短于 D组,差异有统计学意义(P<0.05)。  ⑤C组细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达高于D组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。  ⑥基质金属蛋白酶-12(MMP-12)的表达在B组、C组及D组增强,以D组表达为高,但与C组比较差异尚无统计学意义(P=0.101)。  结论:  热毒血瘀证可通过下调ERK1/2、MMP-2的表达,抑制MMP-2活性的同时上调MMP-12的表达,从而抑制血行肺转移C26结肠癌细胞的增殖和转移,延长荷瘤小鼠的生存期。
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