背景及目的结直肠癌的发生是控制细胞分化的癌基因表达和抑癌基因功能丧失共同作用的结果。最近在体外试验和动物实验中，发现癌基因Pokemon可以特异性地抑制抑癌基因ARF的作用，在肿瘤的发生发展过程中起重要的作用。p14ARF作为抑癌基因可以阻断p53蛋白降解，还原p53介导的转录激活活性，延长半衰期，恢复p53的细胞监控作用；p53能通过细胞外刺激信号的转导诱导细胞凋亡。结直肠癌中p53发生基因突变，可通过免疫组化检测其突变型蛋白表达。目前p53和p14ARF与结直肠癌的关系研究较多，Pokemon可以通过ARF-p53途径发挥致癌作用，而Pokemon在结直肠癌中的表达研究很少。本课题收集不同病理程度的结直肠癌标本，检测Pokemon的基因水平，同时检测p14ARF、p53的蛋白表达，进而分析Pokemon与p14ARF、p53表达的相关关系，为结直肠癌的形成发展机制提供分子生物学方面的依据。材料及方法2005年4月到2005年12月同济大学附属第十人民医院经手术后病理证实为结直肠癌病例39例，结直肠癌术后吻合口复发或伴有其他脏器原发癌肿的患者不在本研究之内。所有病例术前未采取化疗和／或放疗，术后经病理组织学检查证实诊断。采用半定量RT-PCR法检测结直肠癌及癌旁组织Pokemon的表达。常规HE染色了解病理分期和组织分型。标本的免疫组化染色采用链球菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)，检测癌组织及癌旁组织中p14ARF和p53的表达分布情况。统计检验采用SPSS10.0对所得数据进行分析。结果RT-PCR半定量测定结果结直肠癌组织和癌旁组织中均有Pokemon基因表达，癌组织中基因表达明显高于癌旁正常组织，两者相比较有显著性差异(P＜0.05)。基因的表达与癌组织的分化程度相关，高分化组Pokemon基因的表达高于中低分化组，两者相比较有显著性差异(P＜0.05)。免疫组化测定结果结直肠癌组织和癌旁组织中均有p14ARF蛋白的表达，癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织，两者比较有显著性差异(P＜0.05)，p14ARF蛋白的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、癌组织的分化程度、结直肠癌的Dukes分期无相关性(P＞0.05)。结直肠癌组织和癌旁组织中均有突变型p53蛋白的表达，癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织，两者比较有显著性差异(P＜0.05)，突变型p53蛋白的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、癌组织的分化程度、结直肠癌的Dukes分期无相关性(P＞0.05)。结论1．结直肠癌组织中Pokemon基因表达增强，与癌旁正常组织相比有显著性差异，说明Pokemon与结直肠癌的发生有相关性。Pokemon基因表达与癌组织的分化程度相关，高分化组Pokemon基因的表达高于中低分化组，说明Pokemon基因表达可能与结直肠癌的恶性程度有关。2．结直肠癌组织及癌旁组织中Pokemon基因表达与p14ARF蛋白表达呈负相关关系，说明Pokemon的作用机制可能是通过抑制ARF蛋白产生的。3．结直肠癌组织及癌旁组织中Pokemon基因表达与p53蛋白表达无明显相关，说明Pokemon可能不直接抑制p53蛋白的表达，但由于检测的是突变型p53蛋白，并不能完全排除Pokemon在p53途径中的作用。