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目的:本研究旨在探讨EGFR-TKIs在食管鳞癌细胞系中的抗肿瘤活性及分子机制,为食管鳞癌的综合治疗提供新的思路。方法:本研究采用CCK-8法检测EGFR-TKI（Afatinib与Erlotinib）对食管鳞癌细胞的体外抗肿瘤活性;通过皮下成瘤建立SPF级BALB/ca-nu裸鼠食管鳞癌细胞动物模型,观察Afatinib和Erlotinib对食管鳞癌细胞体内抗肿瘤活性的影响;运用Western-Blotting法检测经Afatinib处理后的食管鳞癌细胞中蛋白表达、信号通路的改变;应用流式细胞术检测细胞周期及凋亡相关的改变。结果:体外实验:在KYSE30、KYSE150、KYSE450、KYSE510以及EC109食管鳞癌细胞系中,Afatinib与Erlotinib的IC50值分别为0.04615（95%CI值0.01240-0.1718,r2=0.8218）以及0.1500（95%CI值0.07653-0.2939,r2=0.9473）、0.04089（95%CI值0.02331-0.07174,r2=0.9645）以及0.4085（95%CI值0.1812-0.9207,r2=0.9254）、56.84（95%CI值6.364-507.7,r2=0.8645）以及10.69（95%CI值0.8571-133.3,r2=0.6724）、3.616（95%CI值0.4716-27.72,r2=0.6229）以及40.64（95%CI值18.18-90.85,r2=0.9661）、0.01330（95%CI值0.01016-0.01740,r2=0.9904）以及0.02394（95%CI值0.01691-0.03388,r2=0.9851）。动物实验:Afatinib组的皮下瘤重量与Erlotinib组（P<0.0001）及对照组（P=0.0002）比较均有显著下降,差异具有统计学意义;而Erlotinib组的皮下瘤重量与对照组相比差异无统计学意义（P=0.5524）。对三组数据进行方差分析,Afatinib组、Erlotinib组和对照组的皮下瘤重量之间的差异也具有统计学意义（P<0.0001）。Afatinib组裸鼠在给药的前3天体重有一个较急剧的下降过程（P=0.0185）,第3-6天裸鼠体重继续缓慢下降（P=0.0006）,6天后Afatinib组裸鼠的体重开始缓慢回升。相比而言,Erlotinib组与对照组的裸鼠在实验过程中体重变化较为平缓。在最后一次记录中,三组裸鼠的体重较为接近,差异不具有统计学意义（P=0.812）。Western-Blotting法:在Afatinib处理后的KYSE30食管鳞癌细胞系中,pEGFR以及pERK的表达水平与对照组KYSE30食管鳞癌细胞系相比明显下调;而pAKT以及mTOR的表达水平与对照组相比没有下调。流式细胞术:Afatinib处理后的KYSE30食管鳞癌细胞系发生G0/G1期阻滞,但凋亡不明显。结论:Afatinib较Erlotinib对KYSE30食管鳞癌细胞系具有更强的体内外抗肿瘤活性,通过下调pEGFR-pERK通路的表达抑制KYSE30食管鳞癌细胞系增殖,并有望成为具有EGFR突变/扩增食管鳞癌的潜在分子靶向药物。