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石斛属(Dendrobium),兰科(Orchidaceous)植物的第二大属,具有广泛的神奇药效。本课题以贵州赤水金钗石斛为原料,研究了其干燥方法及其活性成分金钗石斛总黄酮和石斛碱的同时提取、同步分离技术,并对纯化后总黄酮的抗氧化活性进行初步研究,为金钗石斛的综合开发和有效利用提供理论基础和技术支持。主要涉及的研究内容及结果如下:(1)建立金钗石斛总黄酮、石斛碱的含量测定方法。分别采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法(NaNO2-Al(NO3)3-NaOH)和高效液相色谱法(HPLC)测定金钗石斛总黄酮和石斛碱含量,该方法的重复性、稳定性良好,加标回收率高,测得金钗石斛总黄酮、石斛碱含量分别为4.973 mg/g和2.326 mg/g。(2)研究金钗石斛的干燥方法。以含水量为指标,建立了4种干燥方法(微波干燥,热风干燥,热风-微波联合干燥,杀青、热风-微波联合干燥)。比较不同干燥方法对金钗石斛有效成分含量的影响及干燥成本,得出最优的干燥方法是微波干燥,该方法处理后所得的总黄酮和石斛碱的含量最高,分别为0.407%、0.180%;干燥时间为40 min,远短于其他3种干燥方法;且干燥成本、设备投资低。(3)研究金钗石斛总黄酮和石斛碱的同时提取技术。首次将离子液体超声微波协同萃取(IL-UMAE)技术应用于金钗石斛总黄酮和石斛碱的提取,与加热回流提取(HRE)相比,金钗石斛总黄酮和石斛碱的得率分别提高了14.22%和23.76%,提取时间从90 min(HRE)缩短到185 s。利用响应面试验设计得到的最佳提取条件为:1.0 mol/L[Bmim]BF4为萃取溶剂,微波功率328 W,提取时间185 s,料液比1:22(W/V),测得金钗石斛总黄酮得率平均值为0.490%,石斛碱得率平均值为0.224%。(4)利用大孔树脂同步分离金钗石斛总黄酮和石斛碱,并对离子液体的回收及重复利用进行探究。通过静态吸附和解吸试验以及吸附动力学研究,筛选出适合同步分离金钗石斛总黄酮和石斛碱的大孔树脂AB-8,且两成分的吸附平衡符合单分子层吸附的Langmuir模型,温度选择25℃。进一步优化动态吸附和解吸条件,即取3 BV总黄酮浓度为0.392 mg/mL、石斛碱浓度为0.180 mg/mL的金钗石斛提取液,1 BV/h上样至动态吸附达到平衡后,依次用4 BV的水、20%乙醇、50%乙醇和80%乙醇进行梯度洗脱。收集50%乙醇洗脱组份富集金钗石斛总黄酮,纯度达到20.89%,回收率为79.43%;收集80%乙醇洗脱组份富集石斛碱,纯度达61.04%,回收率为86.49%。回收上样流出液及水洗液中的离子液体,回收率为93.67%,用于提取金钗石斛总黄酮和石斛碱,得到总黄酮得率为0.483%,石斛碱得率为0.223%,表明离子液体可重复利用。(5)着重从清除DPPH自由基、O2-自由基以及与Fe2+螯合能力等方面对纯化后金钗石斛总黄酮抗氧化活性进行研究。与对应的阳性对照相比,发现金钗石斛总黄酮对DPPH·和O2-·有较强的清除能力,以及具有一定的Fe2+螯合作用。当浓度为1.0 mg/m L时,金钗石斛总黄酮的DPPH·清除率达到83.01%,O2-·清除率达到78.64%,Fe2+螯DPPH·>O2-·>Fe2+,表明纯化后的金钗石斛总黄酮有一定的抗氧化活性。