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目的:1.调查RAB27B在急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)和正常对照骨髓单个核细胞中的表达差异及其与患者总体生存率之间的关系;2.明确AML和正常骨髓CD34~+CD38~-细胞群中RAB27B mRNA的表达差异;3.研究体外下调RAB27B对白血病干细胞的影响;4.初步研究体外下调RAB27B抑制白血病干细胞外排外泌体对骨髓间充质细胞(Bone marrow mesenchymal cells,BMSCs)的影响。方法:1.通过GEPIA,Oncomine,UALCAN,LinkedOmics在线数据库分析RAB27B在AML和正常对照骨髓单个核细胞中的表达差异及其与患者总体生存率之间的关系;2.收集AML患者和正常骨髓单个核细胞以及3种白血病细胞系,磁珠分选出CD34~+CD38~-细胞群,qPCR检测RAB27B mRNA表达水平;3.通过电穿孔转染siRNA下调富含白血病干细胞的CD34~+CD38~-细胞群的RAB27B表达,转染24小时后,qPCR检测RAB27B mRNA水平,验证siRNA转染效率;分别于转染后第1、2、3天,CCK8法检测细胞增殖;转染72小时后,检测细胞增殖、周期、β-半乳糖苷酶活性、凋亡等指标;4.收集CD34~+CD38~-KG1a细胞培养上清,超速离心法提取外泌体;同时收集正常骨髓,通过贴壁培养法传代富集BMSCs,显微镜下观察细胞形态特征,培养至第3代后,流式细胞术检测间充质细胞免疫标记CD73、CD90、CD34和CD45;然后将CD34~+CD38~-KG1a细胞外泌体与BMSCs共培养,48小时后,检测BMSCsβ-半乳糖苷酶活性以及RAB27B表达水平。结果:1.基于数据库挖掘分析发现:RAB27B在AML患者中的表达高于正常人群对照,并与患者总体生存率呈负相关;2.RAB27B在AML原代细胞以及细胞系的CD34~+CD38~-细胞群中呈现高表达;3.下调RAB27B可诱导富含CD34~+CD38~-细胞群的KG1a细胞增殖抑制和周期阻滞,并可诱导KG1a细胞β-半乳糖苷酶活性增加但不影响细胞凋亡;4.KG1a细胞来源外泌体可诱导人骨髓间充质细胞的β-半乳糖苷酶活性与RAB27B mRNA表达水平增加,下调RAB27B减少KG1a细胞外排的外泌体可阻止人骨髓间充质细胞的β-半乳糖苷酶活性增加,同时下调了BMSCs胞内RAB27B mRNA的表达。结论:RAB27B在AML干细胞中选择性高表达,下调RAB27B抑制外泌体外排可重启AML干细胞衰老,但阻止白血病干细胞来源外泌体对BMSCs的衰老诱导作用。因此,RAB27B有望充当AML治疗的新靶标。