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慢性髓系白血病(CML)是一种起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病，其特征性遗传学标志是由染色体易位形成费城(Ph)染色体。由易位染色体产生的Bcr-Ab1融合基因编码产生分子量为210kD的Bcr-Ab1融合蛋白，最初在造血干细胞中表达，促进骨髓及淋巴样细胞的分化，具有异常增高的蛋白酪氨酸激酶活性，被认为是CML发病的始发因素。
传统的CML的治疗采用羟基脲、马利兰、甲异靛及干扰素等药物疗效欠佳且副作用大。随着对Bcr-Ab1蛋白活性的深入研究，使其成为CML治疗的重要的分子靶点。伊马替尼(Imatinib)作为小分子Bcr-Ab1酪氨酸激酶抑制剂以其显著的疗效及毒副作用低的特点，成为目前CML治疗的一线用药。但随着临床用药的增加Imatinib耐药问题逐渐突显。另外，Imatinib不能根除残留的白血病干细胞及原始祖细胞，成为疾病复发的危险因素。因此寻找新靶点或多靶点药物成为CML研究的热点。
临床上常见的获得性Imatinib耐药机制主要分为两类：Bcr-Ab1依赖型及Bcr-Ab1非依赖型。Bcr-Ab1依赖型耐药中主要原因为Bcr-Ab1基因发生位点突变以及扩增引起的表达增加。另外，从Immatnib耐药的患者中分离的细胞系中发现Src激酶家族(SFK)成员中Lyn及Hck过表达，提示SFK涉及Bcr-Ab1非依赖型Imatinib耐药。由于Ab1与SFK成员中具有明显的序列同源性及活性中心结构相似性。因此，在对多种不同化学结构的Src激酶抑制剂的研究中包括Bosutinib、Dasatinib及INNO-0406等，发现这些化合物能够较Imatinib更有效地抑制Bcr-Ab1激酶活性，并且对多种位点突变的Bcr-Ab1有效。
FB2是一种新型的噻唑类衍生物，前期研究已经证实其可有效地抑制Imatinib敏感及无Bcr-Ab1点突变的耐药K562细胞系。本研究将观察FB2对Imatinib耐药的具有Ab1激酶点突变的Ba/F3P210（WT、Y253F及T315I）白血病细胞的作用及机制，并建立四种不同的动物模型Ph+的K562及体外建立的Imatinib耐药株K562/G7.0NOD/SCID小鼠模型，Ba/F3P210（WT及Y253）白血病小鼠模型，以观察FB2对不同耐药机制动物模型中位生存期的影响。
基于FB2是在Dasatinib的结构基础上优化改造，推测其与Ab1结合不会像Imatinib对蛋白结构要求严格，因此本实验首先纯化野生型(WT)及具有突变位点（Y253F及T315I）的Ab1激酶区，利用Histone2B作为Ab1激酶的底物，结果显示FB2在纳摩尔水平能够有效地抑制Ab1（WT及Y253F）激酶活性，而对T315I突变的Ab1无效。同时进一步检测了FB2对Src及Lyn的体外激酶活性抑制作用，结果显示其对激酶活性的IC50值分别为1.37nmol/L和2.83nmol/L。
此后，采用Ba/F3P210细胞系包括野生型及两株具有突变位点Y253F及T315I的细胞观察FB2对细胞增殖的影响。MTT结果显示，FB2明显抑制Ba/F3P210WT及Y253F细胞（IC50分别为1.30nmol/L，2.56nmol/L）的生长，对Ba/F3P210T315I无效。另外，为进一步探讨FB2抗Imatinib耐药的作用机制，对细胞内Bcr-Ab1、c-Src和Lyn蛋白的磷酸化水平进行检测，结果与体外活性测定一致，FB2能够明显抑制Ba/F3P210WT及Y253F细胞Bcr-Ab1、c-Src和Lyn蛋白的自身磷酸化水平，但对Ba/F3P210T315I细胞仅能抑制c-Src和Lyn蛋白活性。同时在对细胞周期的影响的研究中发现，FB2在纳摩尔水平可使Ba/F3P210(WT、Y253F)细胞发生G0/G1期阻滞，将药物浓度增加至微摩尔水平能增加Ba/F3P210T3151细胞G0/G1期细胞比例。
最后，通过尾静脉注射不同类型CML细胞株建立白血病动物模型评价FB2治疗CML的作用。无药物处理的对照组小鼠很快发展为白血病小鼠，生存期在27～75天，FB2可以明显延长包括K562敏感株、Lyn激酶过表达的K562/G7.0耐药株、Ba/F3P210野生株及Imatinib耐药Y253F点突变株，四种不同白血病小鼠模型的生存期，且具有良好的剂量效应关系。在动物实验观察周期均在三个月以上，FB2治疗组动物对药物耐受性均较好，无体重下降现象出现，一定程度上反映了该药毒副作用小的特点。
综上，FB2作为一种酪氨酸激酶抑制剂，具有明确的Bcr-Ab1及Src激酶抑制作用，可能成为治疗CML并克服除T315I突变的Imatinib耐药的新的治疗药物。