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花粉管作为雄性生殖单位的载体,其萌发及伸长是开花植物有性生殖的重要阶段,并在植物授粉受精过程中起到了重要的作用。二倍体和天然三倍体枇杷在生殖发育过程存在较大的差异,三倍体枇杷在减数分裂、授粉受精过程中存在异常现象,其中大部分花粉管萌发和伸长受阻。花粉管生长发育受众多基因调控,而三倍体枇杷花粉管生长发育受阻可能与其过程中部分的基因表达差异有关。因此,研究三倍体枇杷花粉管生长发育调控机制,对三倍体枇杷生殖发育相关研究提供重要参考,且对研究多倍体植物授粉受精调控机理具有重要的生物学意义。本研究在“龙泉1号”二倍体(B2)和天然三倍体突变体(B355)转录组测序和数字表达谱分析的基础上,筛选与花粉管生长发育相关的5个基因进行片段克隆；利用生物信息学分析5个基因片段的生物学特性；并利用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)技术进行5个基因片段的时空表达特性分析。以期探讨这些基因在不同倍性枇杷花粉管生长发育过程中的表达差异,明确其在不同倍性枇杷中的表达模式,从而为三倍体枇杷花粉管生长发育相关的关键基因筛选和进一步分析三倍体枇杷育性网络调控机理研究提供参考。本研究取得的主要结果如下：1、B2和B355花粉管生长发育差异基因的筛选在转录组测序和数字表达谱分析的基础上,对2413个B2和B355的差异表达基因进行了分析,从中找到18个与花粉管相关的基因,并筛选出5个信息详尽且在不同倍性中表达差异较大的基因,即CL1893, CL13463, CL12486, CL9564和Unigene4683基因作为克隆候选序列。2、枇杷CL1893, CL13463, CL12486, CL9564 和 Unigene4683基因片段克隆①序列长度为1034bp的CL1893基因片段,与富亮氨酸重复类受体蛋白激酶(the leucine-rich repeats receptor-likeprotein kinase,LRR-RLK)高度同源,预测该基因可能位于花粉管顶端,参与花粉管的生长发育过程；②序列长度分别为426bp和736bp的CL13463片段和CL9564片段,初步判断二者可能为ANXl和ANX2的同源基因,可能具有维持花粉管形态的功能；③序列长度为972bp的CL12486片段为鸟嘌呤核苷酸交换因子(Rho-G1 EF)的同源基因,预测它参与花粉管的生长；④序列长度为740bp的Unigene4683片段为果胶酯酶同源基因片段,该基因可能参与调控花粉管的生长速度。上述5个基因片段的功能预测显示,均与花粉管生长发育相关。3、CL1893,CL13463,CL12486,CL9564,Unigene4683基因时空表达分析5个基因的荧光定量结果显示它们的表达模式相似,并且均与枇杷花粉管生长发育相关。CL1893,CL13463,CL12486, CL9564,Unigene4683基因在二倍体和三倍体枇杷中的表达模式不一致。所有基因在“龙泉1号”二倍体枇杷的表达量整体高于三倍体；基因在二倍体枇杷花粉做父本的材料中的表达量高于以三倍体枇杷花粉作父本；基因在三倍体授粉后16h-32h时期有一个表达高峰,且在B2自交的材料中这个峰值出现的时间点比其他杂交组合提前。在分离的组织花柱中,CL9564和CL13463基因在二倍体自交48h时的表达量开始明显下降；三倍体做母本,基因在授粉后子房中的表达极低。总之,5个基因在三倍体下调表达；且父本的倍性可以影响基因在枇杷授粉后的表达模式；同时母本的倍性会影响基因在枇杷授粉后的表达时期和表达量。