甜菜夜蛾几丁质合成酶B的克隆和表达研究

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我们克隆得到了甜菜夜蛾几丁质合成酶B基因(SeCHtSB),并通过RACE的方法得到了包括3’及5’端在内的基因的cDNA全长序列(NCBI GenBank登陆号为:DQ972929)。基因的开放读码框为4572bp,编码1532个氨基酸,其蛋白分子量大约为174.6KD,在蛋白的中间位置具有一个明显的与其他昆虫的几丁质合成酶B基因同源性很高的区域,可能是此蛋白的活性区域。采用RT-PCR和Northern杂交的方法,我们研究分析了SeCHSB的时空表达,发现SeCHSB基因只在甜菜夜蛾的中肠有表达,并且表达量在5龄第一天最高,因为我们推测此基因对昆虫的生长发育有十分重要的影响。同时,我们用生物学软件分析阐述了甜菜夜蛾几丁质合成酶B基因与已知的甜菜夜蛾几丁质合成酶A基因、以及与其他昆虫几丁质合成酶基因之间的进化关系,为进一步研究基因的功能奠定基础。
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