【摘 要】
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目的分析M1和M2型肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAM）在肝癌组织中的分布差异与肝癌患者预后相关性。分析TAM-M1极化基因SPON2在肝癌细胞中的表达变化,在人肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）细胞株中敲低miR-210-5p研究miR-210-5p是否通过调控SPON2引起肝癌细胞对索拉非尼敏感性的改变。方法使用
【基金项目】
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项目名称:缺氧条件下miR-210-5p调控SPON2介导肝癌TAM细胞M2极化参与耐药的机制研究,项目合同编号:81860504,项目来源:国家自然科学基金地区基金项目,项目起止时间:2019.01-2022.12
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目的分析M1和M2型肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAM）在肝癌组织中的分布差异与肝癌患者预后相关性。分析TAM-M1极化基因SPON2在肝癌细胞中的表达变化,在人肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）细胞株中敲低miR-210-5p研究miR-210-5p是否通过调控SPON2引起肝癌细胞对索拉非尼敏感性的改变。方法使用免疫组化方式检测TAM-M1标志物HLA-DR、TAM-M2标志物RELM-β在68例肝癌患者癌组织、癌旁正常组织中的分布差异和预后相关性;实时荧光定量PCR（q PCR）法检测肝癌细胞中miR-210-5p和SPON2的表达情况;在肝癌细胞系SMMC-7721和MHCC-97H中转染100n M浓度的miR-210-5p inhibitor和inhibitor NC后,通过CCK8检测敲低miR-210-5p后肝癌细胞对索拉非尼药物的敏感性的改变。结果（1）免疫组化结果显示:在显微镜20倍的视野下观察68例肝癌组织中的癌组织和癌旁组织。发现TAM-M1在癌组织计数的中位数为165个,范围0～964个,癌旁组织中计数的中位数为334个,范围0～1003个,TAM-M1癌组织中的细胞数（165±23.43）小于癌旁组织（333.32±36.43）,差异有统计学意义（p<0.05）;TAM-M2在癌组织中计数的中位数为487.8个,范围0～1295个,癌旁组织中计数的中位数为299个,范围0～1033个,TAM-M2在癌组织中的细胞数（487.76±53.84）大于癌旁组织细胞数（299.02±40）,差异有统计学意义（p0.05）,TAM-M2阳性表达患者高比例组与低比例组生存期（OS=21.5 vs 11个月）之间差异有统计学意义（p<0.05）;（3）qPCR结果显示:在SMMC-7721和MHCC-97H中敲低miR-210-5p后SPON2表达显著增加（p<0.05）;（4）CCK8检测结果显示:在SMMC-7721和MHCC-97H中敲低miR-210-5p后发现索拉非尼对肝癌细胞抑制率增加（IC50=18.23±2.1μM vs25.44±3.26μM;17.69±3.74μM vs 20.62±4.19μM）（p均<0.05）。结论（1）TAM-M1、TAM-M2在肝癌组织中的癌组织和癌旁组织分布不同,TAM-M1的分布差异与肝癌患者预后无相关性,TAM-M2的分布差异与患者预后有相关性;（2）敲低肝癌细胞SMMC-7721和MHCC-97H的miR-210-5p可提高SPON2的表达水平;（3）敲低肝癌细胞SMMC-7721和MHCC-97H的miR-210-5p可增强索拉非尼对肝癌的生长抑制率。
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