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目的：探究PIK3R5基因及p101蛋白在人类结直肠肿瘤及正常结直肠组织中的表达差异及其临床意义。
方法：
1.收集结直肠肿瘤组织55例(其中有30例与新鲜标本匹配)，相应的正常组织55例，通过免疫组化染色，使用image-Proplus6.0软件采集并计算组织平均光密度，对样本平均光密度进行数据分析，探究PIK3R5基因编码的p101蛋白在结直肠肿瘤及正常结直肠组织中的表达差异。收集相应病人的临床资料，如性别，年龄，肿瘤位置，肿瘤的分期，浸润深度，是否有淋巴及远处转移，以及肿瘤标志物等，并对实验数据与患者临床数据进行分析。
2.收集30例病人的新鲜结直肠肿瘤组织及相应正常组织标本，通过westernblot的方法，来确定PIK3R5编码的p101蛋白在结直肠肿瘤及相应正常组织中表达的差异，并与病人的临床资料进行统计分析。
3.对30例病人的新鲜结直肠肿瘤组织及相应正常组织标本，通过real-timePCR的方法分别测量PIK3R5基因在结直肠肿瘤组织及相应正常结直肠组织中的表达差异。
结果：
1.免疫组化：55例病人中，结直肠肿瘤组织p101蛋白的表达量高于正常组织。肿瘤组织的p101蛋白免疫组化染色平均光密度为0.244±0.0603，配对正常组织腺体中p101蛋白免疫组化染色平均光密度为0.120±0.059。p101蛋白在结直肠肿瘤组织中均表现为强阳性，且表达量明显高于正常结直肠组织，经统计学分析差异存在统计学意义(P＜0.01)。且在性别、年龄、肿瘤原发部位、浸润深度、区域淋巴结转移、远处淋巴结转移、TNM分期方面，结直肠肿瘤组织中p101蛋白的表达量均高于正常结直肠组织，且差异存在统计学意义。对数据行Pearson相关性分析，发现结直肠肿瘤组织在浸润深度、区域淋巴结转移、远处淋巴结转移、TNM分期方面与p101蛋白的表达量成正相关，且差异存在统计学意义。
2.westernblot：30例病人的结直肠肿瘤组织p101蛋白的表达量高于正常结直肠组织，其中肿瘤组均数为6.404±6.701，正常组织均数为2.421±2.819。经统计分析，差异存在统计学意义(P=0.006)。
3.real-timePCR：30例正常结直肠组织的PIK3R5基因表达量高于相应肿瘤组织，肿瘤组织的基因表达均值为1.012±1.090，正常组织的基因表达均值为1.651±1.394，经统计学分析，差异不存在统计学意义(P=0.074)。使用GEPIA数据库查询PIK3R5基因表达情况，正常结直肠组织的PIK3R5基因表达量要高于肿瘤组织，实验中PIK3R5基因的表达趋势与数据库中相同。
结论：
在蛋白层面，PIK3R5基因编码的p101蛋白在结直肠肿瘤中的表达高于正常结直肠组织，且存在统计学差异。并且与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、肿瘤TNM分期程度相关。虽然在基因层面PIK3R5基因在肿瘤组织中的表达量低于正常组织，但差异不存在统计学意义。由于哺乳动物细胞中mRNA与其编码的蛋白质的相关性只有30%-40%,而且基因并不参与细胞功能，所有我们应该重点关注p101蛋白的功能。
方法：
1.收集结直肠肿瘤组织55例(其中有30例与新鲜标本匹配)，相应的正常组织55例，通过免疫组化染色，使用image-Proplus6.0软件采集并计算组织平均光密度，对样本平均光密度进行数据分析，探究PIK3R5基因编码的p101蛋白在结直肠肿瘤及正常结直肠组织中的表达差异。收集相应病人的临床资料，如性别，年龄，肿瘤位置，肿瘤的分期，浸润深度，是否有淋巴及远处转移，以及肿瘤标志物等，并对实验数据与患者临床数据进行分析。
2.收集30例病人的新鲜结直肠肿瘤组织及相应正常组织标本，通过westernblot的方法，来确定PIK3R5编码的p101蛋白在结直肠肿瘤及相应正常组织中表达的差异，并与病人的临床资料进行统计分析。
3.对30例病人的新鲜结直肠肿瘤组织及相应正常组织标本，通过real-timePCR的方法分别测量PIK3R5基因在结直肠肿瘤组织及相应正常结直肠组织中的表达差异。
结果：
1.免疫组化：55例病人中，结直肠肿瘤组织p101蛋白的表达量高于正常组织。肿瘤组织的p101蛋白免疫组化染色平均光密度为0.244±0.0603，配对正常组织腺体中p101蛋白免疫组化染色平均光密度为0.120±0.059。p101蛋白在结直肠肿瘤组织中均表现为强阳性，且表达量明显高于正常结直肠组织，经统计学分析差异存在统计学意义(P＜0.01)。且在性别、年龄、肿瘤原发部位、浸润深度、区域淋巴结转移、远处淋巴结转移、TNM分期方面，结直肠肿瘤组织中p101蛋白的表达量均高于正常结直肠组织，且差异存在统计学意义。对数据行Pearson相关性分析，发现结直肠肿瘤组织在浸润深度、区域淋巴结转移、远处淋巴结转移、TNM分期方面与p101蛋白的表达量成正相关，且差异存在统计学意义。
2.westernblot：30例病人的结直肠肿瘤组织p101蛋白的表达量高于正常结直肠组织，其中肿瘤组均数为6.404±6.701，正常组织均数为2.421±2.819。经统计分析，差异存在统计学意义(P=0.006)。
3.real-timePCR：30例正常结直肠组织的PIK3R5基因表达量高于相应肿瘤组织，肿瘤组织的基因表达均值为1.012±1.090，正常组织的基因表达均值为1.651±1.394，经统计学分析，差异不存在统计学意义(P=0.074)。使用GEPIA数据库查询PIK3R5基因表达情况，正常结直肠组织的PIK3R5基因表达量要高于肿瘤组织，实验中PIK3R5基因的表达趋势与数据库中相同。
结论：
在蛋白层面，PIK3R5基因编码的p101蛋白在结直肠肿瘤中的表达高于正常结直肠组织，且存在统计学差异。并且与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、肿瘤TNM分期程度相关。虽然在基因层面PIK3R5基因在肿瘤组织中的表达量低于正常组织，但差异不存在统计学意义。由于哺乳动物细胞中mRNA与其编码的蛋白质的相关性只有30%-40%,而且基因并不参与细胞功能，所有我们应该重点关注p101蛋白的功能。