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目的:结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤。目前大量研究证实结直肠癌的发生经历了“炎症-异型增生-腺瘤-癌”的过程。中医药在防治结直肠癌癌前病变方面具有良好的临床疗效。因此,本课题以炎症相关性结直肠癌为研究对象,采用《金匮要略》中治疗肠痈的薏苡附子败酱散进行干预,观察其对结直肠肿瘤的发生、生长以及对肠道菌群与其相关的免疫调节作用;探讨其在菌群微环境-肿瘤相关巨噬细胞-IL-6/STAT3信号通路调节结直肠肿瘤发生发展中的作用机制,为临床运用薏苡附子败酱散防治结直肠癌提供实验依据。方法:通过文献研究,从释义、病机、治法、用药等方面论述肿瘤与痈疽的相关性。采用AOM/DSS方法建立炎症介导的结直肠癌自发肿瘤模型。通过16s r RNA对比分析及血清芯片筛选差异,研究在结直肠癌形成过程中菌群微环境和相关免疫细胞的变化规律。通过建立伪无菌小鼠,利用AOM/DSS炎癌模型,观察脆弱拟杆菌对炎症相关性结直肠癌小鼠的肠道菌群微环境和结直肠肿瘤的调节作用。利用AOM/DSS炎癌模型,研究薏苡附子败酱散对炎症相关性结直肠癌小鼠结直肠肿瘤发生的影响和肿瘤相关巨噬细胞的调节作用。建立体外巨噬细胞与肿瘤细胞共培养的模型,检测薏苡附子败酱散干预后小鼠骨髓巨噬细胞(BMDMs)对MC-38细胞增殖、细胞浸润能力的影响及相关基因和蛋白的调节作用及IL-6/JAK/STAT3通路激活情况。结果:(1)肿瘤与痈在历史文献有相近的记录,气血壅滞是两者的共同病机,治痈理念与药物在肿瘤治疗中有广泛应用。(2)与正常小鼠比较,AOM/DSS炎癌模型小鼠逐渐出现活力降低、进食水减少、体重下降、脱毛、便溏甚至脱肛、便血等症状。造模结束后,可见肠道内分布大量大小不一多向肠腔内突出隆起的瘤体。菌群结果显示,与正常小鼠比较,AOM/DSS炎癌模型小鼠脆弱拟杆菌等物种的丰度上升。Raybiotech血清芯片结果显示,与正常小鼠比较,AOM/DSS炎癌模型小鼠血清中免疫相关因子中,Fas L、MCSF、IL-4、IL-17、CD30L以及PF4等表达差异明显。(3)病理结果和IHC数据显示,与伪无菌AOM/DSS炎癌模型组相比,脆弱拟杆菌干预组小鼠的结直肠部位原位癌发病率增加;脆弱拟杆菌干预组小鼠的肠道肿瘤组织中Ki67和PCNA蛋白阳性表达率明显升高,M2型巨噬细胞相关蛋白Arg-1表达增加(P<0.01)。流式细胞分析数据显示脆弱拟杆菌治疗组小鼠肠道组织中的巨噬细胞CD206的比例上调(P<0.01),Elisa结果证实与M2型巨噬细胞相关分泌型蛋白IL-6、TGFβ等表达显著增加(P<0.01)。(4)与模型组小鼠比较,中高剂量薏苡附子败酱散灌胃给药后,结直肠肿瘤数均减少(P<0.05,P<0.01)。菌群丰度中拟杆菌明显下调(P<0.01);IHC结果和流式检测分析显示,与空白对照组比较,薏苡附子败酱散组的小鼠肿瘤组织中Arg-1蛋白阳性表达率明显降低(P<0.01);小鼠肠道组织中的巨噬细胞CD206的比例下降(P<0.01)。(5)体外实验结果显示,与正常小鼠的BMDMs共培养的肿瘤细胞相比,经过薏苡附子败酱散干预的小鼠BMDMs共培养的肿瘤细胞的增殖和浸润迁移能力减弱;小鼠结直肠癌MC-38细胞内c-Met、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9等蛋白的表达降低(P<0.01)。与正常BMDMs共培养的MC-38细胞相比,经过薏苡附子败酱散干预后BMDMs中BAX表达水平上升、BCL-2表达下降(P<0.01),共培养体系MC-38细胞中STAT3蛋白的磷酸化减弱(P<0.01)。结论:(1)借鉴中医治痈思想对肿瘤的防治有一定指导意义。(2)薏苡附子败酱散可改善AOM/DSS炎癌小鼠的腹泻、脱肛等结直肠症状。减少肠道肿瘤的数目,及肿瘤组织中PCNA、Ki67的表达。(3)薏苡附子败酱散能够调节AOM/DSS炎癌小鼠肠道菌群微环境,通过降低拟杆菌丰度,逆转肿瘤相关巨噬细胞M2型极化,阻断IL-6/JAK/STAT3通路的激活,降低MC-38细胞的增殖,下调c-Met、Cyclin D1、MMPs等蛋白的表达。