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钩藤是我国传统中药,资源丰富,现代药理研究表明,钩藤具显著的降压、抗心律失常、镇静等功效,钩藤碱是钩藤的主要有效成分。本项研究以钩藤的带钩茎杆为研究对象,探讨钩藤总碱提取的最佳工艺,优化钩藤总碱的检测分析手段,探究钩藤碱分离纯化的最佳工艺条件,探索钩藤碱水解产物的制备工艺条件,采用高效液相色谱、紫外扫描光谱、红外光谱等分析鉴定手段对钩藤碱水解产物进行分子表征,并对钩藤碱水解产物的理化性质进行了初步研究,为钩藤碱的进一步开发利用提供基础数据。主要研究成果如下:1.钩藤总碱的提取条件优化利用正交试验设计法,对影响钩藤总碱提取率的主要因素乙醇浓度、料液比、提取时间和超声时间的最佳水平范围及其交互作用进行研究,根据实验数据进行方差分析,得出最佳的提取工艺条件是:乙醇浓度为70%,料液比为1:40,提取时间为36h,超声时间为30 min,钩藤总碱的综合指标达到最大值,即钩藤总碱的提取率最大。2.钩藤总碱的HPLC分析条件优化钩藤总碱中含有钩藤碱、异钩藤碱等几种性质相似的生物碱,用常规的分析方法难以分离和检测出钩藤碱等主要成分,因此本文优化了钩藤总碱的HPLC检测方法,色谱条件:WatersC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为A(乙腈)和B(纯净水)混合梯度洗脱:0-1 0minA(55%-60%);10-13minA(60%-62%),13-18minA(62%-75%)。流速为1mL/min、柱温为30.0℃,进样量为10μL,检测波长为245nm。在这种检测方法下,钩藤总碱中的各生物碱成分分离度较高,且可以很好的将钩藤碱分离开来,为后续分离纯化实验得到的钩藤碱的HPLC色谱分析条件提供依据。3.钩藤碱的分离纯化条件优化提取的钩藤总碱主要包括钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱、柯诺辛碱B等,其中钩藤碱为主要成分。利用薄层色谱(TLC)、高速逆流色谱(HSCCC)两种手段对钩藤总碱进行分离,从而纯化钩藤碱。薄板色谱分离纯化钩藤碱的最佳条件为:展开溶剂体系为氯仿-丙酮(体积比为5:4),该条件可成功地分离出钩藤总碱的七个主要成分,且得到的钩藤碱经HPLC检测分析后,其纯度达90.01%;采用高速逆流色谱技术以氯仿-丙酮-0.2mol/LHCL(体积比为4:1.5:2)为两相溶剂系统,在主机转847r/min、流速2.0mL/min条件下进行分离纯化,可以得到纯度较好的钩藤碱,其纯度为97.98%。4.探讨钩藤碱水解产物的制备工艺条件利用钩藤碱分子结构中含有酯键、酰胺键,故采用碱物质对钩藤碱进行碱解来制备钩藤碱水解产物,并对参数进行优化,得出的工艺条件为:采用2mol/LNaOH进行水浴碱解,碱解温度为100℃,采用3%HCL溶液调碱溶液pH为2,大孔树脂D301与酸水液的质量体积比为2:5,无水乙醇与大孔树脂D301的体积质量比为1.5:4。5.钩藤碱水解产物的理化性质研究利用紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、高效液相色谱(HPLC)等分析手段对钩藤碱水解产物进行了分子表征,结果表明钩藤碱水解产物在224nm左右有最大吸收;经IR分析,钩藤碱水解产物保留了钩藤碱的醚基团,增加了大量的羟基基团,可以初步确定是羧酸盐物质,在指纹区无明显变化,可初步说明其水解产物保留了钩藤碱的主体结构;钩藤碱水解产物对温度和pH具有较好的稳定性,耐光性较差。