人诱导性多能干细胞(iPSc)对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长、转移作用的研究

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人诱导性多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPS cells)是通过基因稳定转染技术将特定的转录因子导入人的体细胞,使体细胞重编程,形成具有多能性干细胞分化能力的类似胚胎干细胞形态的多潜能细胞。人iPS细胞具有的多能干性及分化潜能使其成为基础研究的有利工具,本实验通过裸鼠移植瘤模型研究iPS细胞对人非小细胞肺癌细胞A549细胞移植瘤生长及转移的作用。目的:建立裸鼠iPS细胞和A549细胞移植瘤模型,观察记录肿瘤成瘤情况,绘制肿瘤体积生长曲线;利用小动物活体成像技术,以稳定表达荧光报告基因的细胞成瘤模型为对象,观察裸鼠移植瘤动物模型的发展及转移等生物学特性,探究iPS细胞对人非小细胞肺癌细胞肿瘤的影响。方法:采用BALB/c裸小鼠皮下成瘤方法,注射不同种类、处理的细胞,观察A549细胞和iPS细胞的移植瘤的表型和生长变化。利用荧光蛋白稳定表达的基因稳转细胞,建立了移植A549细胞和iPS细胞的动物肿瘤模型,采用小动物活体成像系统观察荷瘤裸鼠成像效果,观察不同时期两种细胞在裸鼠主要脏器中的荧光表达及分布情况。采用组织切片的方法,观察iPS细胞及A549细胞在肿瘤及脏器中的形态、结构及分化特征。结果:成功建立了小鼠皮下成瘤模型,初步了解A549细胞肿瘤的生物学特征。活体成像系统检测得出GFP在小鼠的肝脏中高表达,而RFP在肝脏中表达量低或不表达。揭示在早期的肿瘤细胞转移中,iPS细胞更倾向于肝脏方向转移。在肿瘤组织切片观察时,发现有可能共表达GFP和RFP两种蛋白的细胞,表明在肿瘤生长过程中两种细胞可能出现融合。
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