文冠果中文冠果皂苷E含量的HPLC测定法的研究及对照品的制备

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文冠果(Xanthoceras sorbifolia Bunge)为无患子科(Sapindaceae)文冠果属植物,分布于我国辽宁、河北、陕西等省。民间多用于治疗风湿性关节炎和小儿遗尿症。现代医学研究表明文冠果具有抗炎、抗癌、抑制HIV蛋白酶、改善学习记忆等药理作用和生物活性,在医药、保健、化工等领域应用前景广阔。文冠果总皂苷是文冠果改善学习记忆障碍的有效部位,文冠果皂苷E(bunkanka saponin E)是其主要有效成分之一。本文以文冠果皂苷E作为对照品,首次建立了利用HPLC法测定文冠果各部位(果壳、果柄、种皮、种仁)中文冠果皂苷E含量的分析方法。测定条件为:HypersilODS2(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇—水—磷酸(V:V:V=70:30:0.02),检测波长210nm,柱温34℃,流速为1.0 mL·min-1。文冠果皂苷E的保留时间在15min左右,与相邻峰分离度大于1.5,达到了色谱分离的要求。质量浓度在0.0098~0.1960 g·L-1内与峰面积成良好线性关系。果壳、果柄、种皮和种仁的平均加样回收率在99.2~100.4%(n=9)范围内。结果表明,果柄中的文冠果皂苷E含量最高(0.45%),果壳(0.20%)、种皮(0.15%)次之,种仁中未检测到文冠果皂苷E。此方法稳定可靠,快速简便,为文冠果药材的质量控制和其不同药用部位的合理利用和综合开发提供了科学依据。从文冠果果柄70%乙醇提取物中,通过系统溶剂萃取、反复硅胶柱色谱及反复重结晶等方法制备对照品文冠果皂苷E,经HPLC法测定含量达到98.6%,满足对照品的要求。在制备对照品的同时,共分离得到了12个化合物。通过理化性质和波谱数据分析鉴定了它们的结构。分别属于三萜类:玉蕊醇R1(1)、21,22-二-O-当归酰基-玉蕊醇R1(2)、3-O-(3-O-α-L-呋哺阿拉伯糖基-2-O-β-D-吡哺半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-21,22-二-O-当归酰基-玉蕊醇R1(文冠果皂苷E)(3)、21-O-当归酰基-玉蕊醇R1(4)、3-羰基甘遂烷-7,24-二烯-21-酸(5);甾醇类:β-谷甾醇(6)、胡萝卜苷(7)、α-菠菜甾醇(8)、α-菠菜甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9);其他类:正三十一烷酸(10)、正二十七烷醇(11)、正丁基吡喃果糖苷(12)。
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