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目的:探究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4是否参与实验性缺血性脑卒中的神经炎症反应,过表达或敲低小鼠脑内丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4对实验性缺血性脑卒中预后的影响。方法:建立小鼠大脑中动脉阻塞模型以模拟缺血性脑卒中。侧脑室注射腺相关病毒搭载的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4过表达质粒以模拟丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4过表达;侧脑室注射腺相关病毒搭载的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4 sh RNA质粒实现敲低丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4的表达。通过蛋白印迹检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4、核因子κB抑制蛋白α、磷酸化的核因子κB抑制蛋白α、细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶1/2、c-Jun氨基末端激酶1/2/3、磷酸化的c-Jun氨基末端激酶1/2/3、肿瘤坏死因子α和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的含量。采用行为学量表评估小鼠运动功能,采用墙角实验评估小鼠感觉功能。通过氯化三苯四氮唑染色测量小鼠脑梗死体积。应用免疫荧光定量小鼠脑内丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4表达阳性的小胶质细胞。结果:(1)小鼠遭受90分钟大脑中动脉阻塞再灌注6小时后,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4的表达即有下降,在再灌注1天时降至最低,在再灌注3天时回升至峰值,随后又下降至较低水平。(2)在小鼠正常脑组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4主要表达在大脑髓质;在小鼠缺血脑组织中的大脑皮质,同正常脑组织的大脑皮质相比丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4表达增加。(3)在小鼠正常和缺血脑组织中,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4同小胶质细胞的标记物Iba1存在共定位现象;丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4与M2型小胶质细胞的标记物精氨酸酶1、CD163和CD206在小鼠缺血脑组织中存在共定位现象。(4)侧脑室注射腺相关病毒搭载的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4过表达质粒显著提升小鼠缺血脑组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4的表达(P=0.000)。与对照AAV组相比,MST4-AAV组的运动功能(P=0.049)、感觉功能(P=0.033)和脑梗死体积(P=0.021)均降低。与对照AAV组相比,MST4-AAV组的磷酸化的核因子κB抑制蛋白α(P=0.000)、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶1/2(P=0.023)、磷酸化的c-Jun氨基末端激酶1/2/3(P=0.000)和肿瘤坏死因子α(P=0.003)的表达下降。MST4-AAV组丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4阳性小胶质细胞数量明显高于对照AAV组(P=0.000)。(5)侧脑室注射腺相关病毒搭载的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4 sh RNA质粒显著降低小鼠缺血脑组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4的表达(P=0.035)。与对照sh RNA组相比,MST4 sh RNA组小鼠运动功能(P=0.042)和感觉功能(P=0.037)更差,且脑梗死体积(P=0.021)增大。与对照sh RNA组相比,MST4 sh RNA组的磷酸化的核因子κB抑制蛋白α(P=0.015)、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶1/2(P=0.000)、磷酸化的c-Jun氨基末端激酶1/2/3(P=0.010)和肿瘤坏死因子α(P=0.033)的表达升高。与对照sh RNA组相比,MST4 sh RNA组丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4阳性小胶质细胞数量明显降低(P=0.000)。结论:(1)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4参与实验性缺血性脑卒中的病理过程。(2)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4可能是M2型小胶质细胞的标记物。过表达丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4改善小鼠实验性缺血性脑卒中后的神经功能评分。其机制可能为通过下调磷酸化的核因子κB抑制蛋白α、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化的c-Jun氨基末端激酶1/2/3和肿瘤坏死因子α的表达减轻神经炎症反应。(3)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4可能是治疗缺血性脑卒中的潜在靶点。