肿瘤的生长具有血管依赖性，肿瘤组织中新生血管的形成不仅为肿瘤细胞的生长、增殖提供了氧和养料以及排除代谢产物的途径，同时也为肿瘤细胞的转移提供了有利条件。而肿瘤血管生成过程受到诸多因素的影响，其中血管内皮生长因子(VEGF)直接作用于血管内皮细胞，能够特异性地刺激血管内皮细胞的增殖和血管生成，增加血管通透性，在肿瘤血管生成中发挥中心调控作用。而VEGF家族中有多个成员，其中VEGF-A通过与血管内皮细胞表面特异性受体Flt-1及Flk-1结合发挥其生物学功能。乏氧诱导因子1(HIF-1)是细胞在缺氧条件下产生的一种核转录因子，它可作用于多种靶基因，使其转录活性发生改变，从而介导组织细胞产生一系列的缺氧适应性反应。 目前，研究者们已在多种实体肿瘤中检测到HIF-1α及VEGFmRNA及其蛋白的过表达，然而，关于HIF-1α与VEGF在卵巢癌中的分析国内外均比较分散，而且大部分仅对HIF-1α或VEGF在卵巢癌中的表达进行了检测。 目的： 本研究旨在通过检测SKOV3人卵巢癌细胞株在乏氧条件下及化疗药物(紫杉醇)调节下HIF-1α及VEGF-A基因mRNA水平表达的变化及其相互关系，为探索卵巢癌的早期诊断及其新的治疗靶点提供重要的研究依据。 方法： 1.常规方法培养SKOV3人卵巢癌细胞株至对数生长期，进行细胞计数并调整细胞浓度。 2.分别将2*106细胞转移至25ml培养瓶内，补入完全培养液至总体积1ml，同时将化疗药物(紫杉醇)分别以3.4ng/ml(低浓度)、4.5μg/ml(中浓度)、0.45mg/ml(高浓度)三种浓度处理细胞，并另设空白对照组(无药物作用)，然后把细胞分别置于富氧(含21％氧气)及乏氧(含1％氧气)两种环境中培养。 3.培养不同时间(30min、1h、4h、8h、24h)后观察细胞的形态学变化并收取细胞。 4.提取细胞总RNA，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量测定HIF-1α及VEGF-A基因mRNA在不同培养条件下的表达水平。 5.分别做出HIF-1α及VEGF-A基因mRNA相对表达强度的柱状图以观察二者之间的关系，并应用SPSS统计分析系统通过相应的统计学方法对实验数据进行统计分析。 结果： 1.各种培养条件下SKOV3人卵巢癌细胞株HIF-1α与VEGF-A基因mRNA的总体表达阳性率均为85％(34/40)。 2.从HIF-1α与VEGF-A基因mRNA表达强度的柱状图可以看出HIF-1α与VEGF-A基因表达的变化趋势大致相同；Spearman等级相关法对二者相关性的分析结果同样表明：HIF-1α与VEGF-A基因密切相关(Rs=0.9227，P＜0.01)。 3.若不考虑中浓度与高浓度药物的作用，分析结果显示：乏氧环境下卵巢癌细胞中HIF-1α及VEGF-A基因的表达显著提高(P=0.0059，0.0137)。 4.应用两因素方差分析分别对紫素浓度对HIF-1α及VEGF-AmRNA表达的影响情况进行分析，同时采用SNK法及TukeyHSD法进一步对其进行两两比较。结果显示：尚不能认为不同浓度的紫素可影响HIF-1α及VEGF-AmRNA的表达(F=1.460，P=0.248，P多重比较=0.273；F=1.239，P=0.315；P多重比较=0.253)。 5.应用与4相同的方法对紫素不同的作用时间对HIF-1α及VEGF-AmRNA表达的影响情况进行分析，结果显示：尚不能认为24小时内紫素对HIF-1α及VEGF-AmRNA的表达有影响(F=0.894，P=0.480，P多重比较=0.481；F=1.627，P=0.195，P多重比较=0.174)。 6.从细胞的形态学变化中可以看出不同浓度的紫素在短时间内对SKOV3人卵巢癌细胞株的生长增殖即有不同程度的影响。 结论： 1.在实体肿瘤组织中，肿瘤细胞普遍存在缺氧，而HIF-1α则介导组织细胞产生一系列的缺氧适应性反应。 2.VEGF-A是HIF-1α的靶基因，HIF-1α在基因水平上直接调控VEGF-A的表达，从而促进肿瘤组织中新生血管的形成以及肿瘤细胞的增殖和转移。 3.HIF-1α的表达及活性受O2浓度的调节。 4.HIF-1α及VEGF作为肿瘤治疗的一个新的靶向目标，深入研究其抑制剂在肿瘤治疗中有着广阔的应用前景。