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研究目的:桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)是由致病因素诱导机体产生自身免疫性反应,最终导致甲状腺滤泡结构破坏和甲状腺功能减退的自身免疫性甲状腺疾病。本研究旨在探索HT患者甲状腺组织中髓关联蛋白14(Myeloid-Related Protein14,S100A9)对甲状腺滤泡上皮细胞和维持细胞间紧密连接的联接粘附分子A(junctional adhesion molecule A,JAM-A)的影响,了解S100A9对HT致病中的作用,为临床提供新的治疗靶点。研究方法:1.获取健康体检者、单纯性甲状腺结节患者与HT患者的血清标本各14例。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)对上述血清中S100A9的含量情况测定。2.通过手术切除获取单纯性甲状腺结节组织标本与HT患者的甲状腺标本各7例。进行免疫组织化学分析,观察S100A9蛋白和JAM-A蛋白的分布及表达情况。3.将S100A9小干扰(si-S100A9-100、si-S100A9-267)序列及阴性对照(si-Con)序列、S100A9过表达质粒(pc DNA3.1 S100A9)及空载对照(pc DNA3.1)质粒转染甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1,48 h后用荧光定量PCR(q PCR)及蛋白印迹(Western blot,WB)的技术检测S100A9与JAM-A的表达。4.S100A9的过表达质粒及空载质粒成功转染入Nthy-ori 3-1 48 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化及数量,流式细胞术检测细胞凋亡。研究结果:1.与健康人或单纯性甲状腺结节对照相比,HT患者血清中S100A9浓度增高。2.HT患者甲状腺组织标本中的S100A9蛋白显著高于单纯性甲状腺结节对照组(P<0.001);相反,JAM-A的表达低于对照组(P<0.001)。3.同对照比较,si RNA-S100A9转染入甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-ori 3-1后,S100A9 m RNA水平明显下降(P<0.01),JAM-A m RNA水平未见明显改变,而JAM-A蛋白水平升高;用pc DNA3.1 S100A9处理甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-ori 3-1,S100A9 m RNA水平显著升高(P<0.01),JAM-A m RNA表达未见明显改变,而JAM-A蛋白水平下降。4.转染成功48h后,与对照组比较,Nthy-ori 3-1中S100A9过表达后细胞变圆并且数量明显减少(P<0.01),流式结果显示细胞凋亡水平(早期凋亡+晚期凋亡)明显升高(P<0.001)。结论:HT患者甲状腺组织中异常高表达的S100A9通过抑制JAM-A蛋白的表达,以及促进甲状腺上皮细胞的凋亡,对正常甲状腺滤泡结构产生不良影响,参与了桥本氏甲状腺炎的发生发展。