论文部分内容阅读
目的：血管性血友病因子(vWF)是动脉血栓的主要成分,血浆中的vWF主要由内皮细胞分泌,介导血小板与血管内皮细胞及内皮下胶原的黏附,在血栓形成过程中起重要作用。血管性血友病因子裂解蛋白酶(vWF-CP)即ADAMTS13,在人体血流正常剪切力作用下,通过裂解位于vWF A2区的842位酪氨酸与843位蛋氨酸之间的肽键,将大分子量vWF多聚体(unusually large vWF multimer, UL-vWF)裂解成小分子肽段,它的活性缺乏将导致血管内的UL-vWF的过多聚集,进而导致血栓形成。凝血酶敏感蛋白1(TSP1)是一种粘附蛋白,作为vWF的还原酶,它通过与ADAMTS13竞争性地结合vWF的A2和A3区,抑制ADAMTS13对vWF的降解。C1423T基因多态性是目前报道的唯一可能与ADAMTS13活性有关的多态性。已有研究显示,ADAMTS13与血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的发生有关系,并且ADAMTS13活性降低在其它血栓性疾病(如急性心肌梗死AMI)发病机制中的研究也取得新的进展；本研究通过测定急性脑梗塞患者血浆中ADAMTS13活性、vWF：Ag和TSP1的水平,并对C1423T的基因多态性进行检测,探讨其在急性脑梗塞中的可能作用。研究对象和方法：选取62例老年急性脑梗塞患者和56例与之匹配的健康对照者,两组在性别、年龄、危险因素(吸烟、高血压、高血脂、糖尿病、C反应蛋白↑、D-二聚体↑)方面差别无统计学意义,具有可比性。采集晨起病人空腹外周血4mL置于枸橼酸钠抗凝管中,2000r/min离心10分钟后分离血浆,-20℃保存备用；用淋巴细胞分离液分离提取单个核细胞,-80℃保存备用。用vWF：Ag和TSP1ELISA试剂盒对两组血浆中的vWF：Ag和TSP1含量进行检测,同时残余胶原结合实验(R-CBA)测定两组的ADAMTS13活性水平,聚合酶链反应(PCR)扩增并酶切扩增产物测定ADAMTS13基因C1423T多态性。采用统计软件SPSS18.0对所得的数据进行统计,计量资料以x±s表示,两样本均数比较用t检验,相关性采用Pearson相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果：1.急性脑梗塞患者血浆中vWF：Ag和TSP1含量均高于正常组(P<0.05),ADAMTS13活性水平低于正常组(P<0.05)。2.急性脑梗塞患者血浆中ADAMTS13活性水平是降低的,而TSP1含量是升高的,两者成负相关(R=-0.663(P<0.05)。3.62例急性脑梗塞患者中3例出现C1423T基因突变(4.84%),高于正常组(0%),且发生突变的ADAMTS13活性较正常人明显降低。结论：1.急性脑梗塞患者血浆中ADAMTS13活性降低,提示ADAMTS13活性降低可能参与脑梗塞的发生发展。2.急性脑梗塞患者血浆中ADAMTS13活性降低,而TSPl水平升高,提示两者存在竞争关系,TSP1在一定程度上可能抑制(?)ADAMTS13对vWF的裂解。3.中国汉族人群中C1423T基因突变可能降低ADAMTS13的活性水平,从而参与脑梗塞的发生。