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目的研究驱动蛋白KIF3B在我国好发的肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,分析KIF3B的表达在HCC细胞增殖过程中的作用和机制。方法1.采用Western blot技术检测8例HCC及邻近癌旁新鲜组织中KIF3B的表达情况;采用免疫组化方法检测57例HCC及邻近癌旁组织石蜡切片中KIF3B和增殖指标Ki67的表达情况,并且结合肝癌的临床病理资料分析KIF3B与HCC患者的年龄、性别、肿瘤组织分级、肿瘤大小、血管侵袭和转移以及血清AFP等因素之间的关系,并对上述肝癌患者进行随访,采用Kaplan-Meier法分析HCC患者的生存率,以及单因素分析和Cox危险比例模型多因素分析KIF3B与HCC预后的关系。2.采用血清饥饿释放同步化处HepG2细胞,用流式细胞仪检测HepG2细胞的细胞周期变化,Western blot技术检测在此过程中KIF3B的表达变化情况;构建si RNA KIF3B转染HepG2细胞,用流式细胞仪检测HepG2细胞的细胞周期变化,CCK-8增殖实验检测细胞的增殖情况的变化,Western blot检测在上述过程中KIF3B及相关蛋白的表达变化。结果1.Western blot和免疫组化的结果分析显示,KIF3B在HCC中的表达明显高于相应的邻近癌旁组织。KIF3B的表达强度与HCC病理分化等级(p<0.001)、肿瘤大小(p=0.002)﹑血清AFP值(p=0.041)之间有显著的统计学意义,相关性分析表明KIF3B与Ki67的表达呈正相关(r2=0.436;p<0.001)。Kaplan-Meier分析显示KIF3B在HCC中的高表达与肝癌患者总生存率的降低有显著的相关性(p<0.01)。单因素分析表明KIF3B与HCC患者的不良预后有关(p<0.01)。Cox危险比例模型分析显示KIF3B可以做为HCC独立的预后指标(p<0.001)。2.血清饥饿造成HepG2细胞生长周期停滞,KIF3B、cyclinA、CDK2、蛋白表达下降,p27kip1蛋白表达增加。siRNA干预细胞后分析显示,KIF3B缺失可引起细胞增殖的下降以及细胞周期的阻滞,并且cyclinA、CDK2、PCNA蛋白表达下降,p27kip1蛋白表达升高,细胞周期G1期比例升高。抑制KIF3B的表达能够诱导细胞的凋亡通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶-Akt信号通路。结论1.KIF3B在HCC中的高表达,并且可以作为HCC患者独立的预后指标,提示KIF3B可能与肝细胞肝癌的发生发展相关。2.在肝癌细胞HepG2增殖的过程中,KIF3B表达是上调的,可能通过参与调节细胞周期相关分子cyclinA、CDK2和p27kip1的表达变化,推动细胞周期进程。