佛手果胶低聚糖的制备及应用

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佛手果渣是佛手产品生产过程中的副产物,每年都会有大量佛手果渣产生,在未经综合利用的情况下,造成资源浪费。佛手果渣中含有黄酮、多糖、果胶和其他有机物质,这些天然产物在食品行业、医药行业和化妆品行业有着广泛的用途。本论文以佛手果渣为研究对象,利用超声波辅助提取技术,提取佛手果渣中的佛手果胶,采用酶法水解佛手果胶来制备果胶低聚糖和低分子果胶,并对低聚糖进行分离纯化、理化分析和结构表征,对分离纯化后的果胶低聚糖的抑菌活性、抗氧化性和果蔬保鲜等三方面应用进行了系统的研究,结果如下:(1)对佛手果渣进行超声波辅助提取佛手果胶工艺进行了单因素和正交试验研究,得到最佳工艺条件组合:料液比为1∶50,pH为1.0,提取温度为90℃,超声时间为90 min。在此最优工艺条件下佛手果胶得率达到18.42%。(2)利用实验室自制的果胶酶A和市售果胶酶B进行佛手果胶低聚糖(BPO)的酶解制备研究。通过对果胶酶B酶法水解条件下的单因素和正交试验条件分析表明,以佛手果胶低聚糖得率为指标,得到最佳制备工艺组合:果胶浓度0.05 g/mL、酶解温度45℃、酶解pH为4.5、果胶酶添加量0.30 mg/mL和酶解时间2 h。在最优条件下,佛手果胶低聚糖得率为64.5%,佛手果胶低聚糖得率增加3.4%。(3)对佛手果胶低聚糖进行了分离纯化和结构表征研究,佛手果胶低聚糖酶解液经分离纯化后得到单一组分BPO-1,平均分子量为2.15×10~3 Da,结果发现佛手果胶低聚糖BPO-1主要由甘露糖、半乳糖醛酸和极少量的阿拉伯糖和半乳糖组成。BPO-1的多糖亚基通过红外光谱法和核磁共振法分析表明其可能构成主链为→4)-α-D-GalpA-(1→。(4)将不同聚合度的佛手果胶低聚糖对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)以及大肠杆菌(Escherichia coli)三种细菌的抑菌活性研究表明,佛手果胶低聚糖对大肠杆菌的抑菌活性要低于枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌。通过对佛手果胶低聚糖最小抑菌活性测定,得出对B.subtilis和S.aureus的平均最小抑菌浓度都是6.0 mg/mL,同时把佛手低聚糖与乳酸链球菌素、山梨酸钾以及苯甲酸钠复配使用后,都表现出了较好的抑菌活性。佛手果胶低聚糖的自由基清除,当佛手果胶低聚糖浓度为25.0 mg/mL时,超氧自由基清除率为23.12%,DPPH自由基清除率为58.67%,实验表明佛手果胶低聚糖具有不错的抗氧化活性。首次利用佛手果胶低聚糖对新鲜草莓进行保鲜实验,浸泡低聚糖溶液的草莓比浸泡无菌水的草莓腐烂时间推迟2天,证明佛手果胶低聚糖对浆果类水果具有较好的防腐保鲜效果。本论文实现了佛手果渣的资源再次利用,为果渣的资源的再次利用并为生产高附加值的产品提供理论依据。首次将分离为不同分子量段的佛手果胶低聚糖进行抑菌实验,证明佛手果胶低聚糖对E.coli、B.subtilis和S.aureus的抑菌效果与其分子量有关。
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