COX-2可通过促进细胞增殖、抑制凋亡、促进肿瘤新生血管形成等机制参与多种肿瘤的发生和发展过程。RNA干扰是一种转录后基因沉默的基因阻断技术，近年来被广泛应用于哺乳动物细胞抑制基因表达。在本课题中，设计并合成针对COX-2的siRNA，转染胃腺癌SGC-7901细胞，检测COX-2蛋白水平表达的变化；观察siRNA对胃癌细胞生长的影响；探讨siRNA转染胃癌细胞后相关信号分子的变化等，为胃癌的基因治疗探索新的方法。 本研究依据siRNA设计原则，针对人COX-2的mRNA序列，设计并化学合成3条21bp的双链RNA，瞬时转染人胃癌细胞SGC-7901，western blot验证基因沉默效率以筛选合适的siRNA序列；结果筛选出一条有效的干扰序列，位于291-311bp。根据筛选出的有效序列，合成编码短发卡RNA的双链寡核苷酸，定向克隆到含有U6 RNA聚合酶Ⅲ启动子的pSilencer 2.1-U6 neo真核表达载体，稳定转染胃癌细胞SGC-7901中，经G418筛选，获得克隆细胞，COX-2在蛋白水平的表达明显被抑制。 将shRNA表达载体稳定转染SGC-7901细胞后，MTT和流式细胞仪技术分析结果表明，细胞的生长速度明显减慢，细胞出现G<,0>-G<,1>期阻滞，与P21上调有关；重组基底膜侵袭能力、趋化运动能力测定结果表明，COX-2基因沉默后MMP-2下调，SGC-7901细胞的侵袭及趋化运动能力显著降低。 用poly-hema阻止细胞贴壁，建立细胞悬浮培养导致失巢凋亡的模型，COX-2基因沉默后，光镜观察细胞积聚体形成变小而松散，Hoechst33342染色出现细胞凋亡现象。用Western blot检测干扰组和对照组，磷酸化PI-3K、磷酸化AKT、Pro-caspase3的表达水平也明显下降；细胞色素C的表达水平增加。 结果表明，RNA干扰的作用效率与COX-2mRNA靶位点密切相关，RNA干扰能高效、特异地抑制胃癌SGC-7901细胞COX-2基因的表达。COX-2基因沉默能影响细胞周期的改变，抑制胃癌细胞的生长，降低其转移和侵袭能力，诱导失巢凋亡，靶向COX-2基因的RNA干扰可作为有效的胃癌基因治疗手段。