苦楝内生真菌及其生物活性物质研究

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植物内生真菌中含有丰富的活性物质,在天然产物药物和农药研究迅速发展的今天,其已成为一种重要的药用资源,是寻找天然活性物质的重要来源。从植物中分离纯化内生真菌,并从中找到活性先导化合物具有很高的开发利用价值。鉴于此,本论文从植物苦楝中分离纯化内生真菌,并从中筛选一株内生真菌来寻找活性化合物。本文主要得出以下结论:(1)从苦楝中共分得70株内生真菌,对其进行分类鉴定,除三种因不产孢未鉴定外,其它的分属于5目、7科、11属,18种。(2)对分离出的17株菌株进行液体培养,并对其发酵产物进行抗菌活性实验。结果表明,在供试质量浓度为50mg/mL时,MA1,MA2,MA4,MA8,MA9,MA15,MA19七个菌株的发酵液和菌丝体粗提物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、灵杆菌、北京棒状杆菌都有较强的抑制活性。(3)在供试质量浓度为50mg/mL时,MA1,MA2,MA4,MA8和MA9五个菌株的发酵液和菌丝体粗提物对小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、苹果炭疽病菌、棉花枯萎病菌表现出了不同程度的抑制菌丝生长活性,而MA1,MA2,MA4,MA8四个菌丝体粗提物对番茄灰霉菌、棉花枯萎菌均有明显的抑制孢子萌发作用。(4)发现MA1,MA2,MA13,MA14,MA15几株菌中可能含有苦楝素。(5)在供试质量浓度为50mg/mL时,菌株MA2的发酵液正丁醇提取物对供试菌中的枯草芽孢杆菌、北京棒状杆菌、绿色木霉有很强的抑菌作用;乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、灵杆菌有很强的抑菌作用,对枯草芽孢杆菌、北京棒状杆菌、绿色木霉有较强抑菌作用。表明两部分均含有抑菌活性成分。且提取物的抑菌作用随浓度增大而增大。菌丝体乙酸乙酯部分对小麦赤霉菌,番茄灰霉菌,辣椒疫霉菌,棉花枯萎菌抑菌活性比总浸膏和正丁醇部分都要强,对苹果炭疽菌比总浸膏和正丁醇部分都要弱。(6)菌丝乙酸乙酯萃取物经过柱层析分离纯化,分离出化合物A,B,C,D。运用EI(FAB)-MS,1HNMR,13CNMR及DEPT等波谱鉴定,并与标准品对照,鉴定A为双氧麦角甾醇,B,C纯度达不到鉴定的标准,D的波谱图无法解释出。
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