一种新型羟基偶氮苯化合物的光感脂质体制备及其对α-乳白蛋白的互作评价

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偶氮苯化合物具有标志性的氮-氮双键,可在相应光线的照射下产生光致异构化效应,即从偏平面结构的反式异构体向弯折的顺式异构体转变的过程。由于该效应高度可逆可控的特征优势,使偶氮苯化合物作为一种极重要的光开关分子在化学、生物及多交叉学科中得到了广泛的应用。特别是近十年以来,偶氮苯化合物在光感有机材料制备、诱导控制释放、生物分子互作和大分子光调控等方向均表现出了较大的研究价值。在以脂质体为代表的药物递送平台中引入偶氮苯单元,可通过后者的光致异构化效应所导致的“端到端”的距离改变来实现增强的控制释放,使包埋物能够在光线的刺激下进行可控释放,其意义在于可以提升生物体内药物的释放率、增强疗效;在与多肽及蛋白质的相互作用研究中,偶氮苯化合物对于肽段或蛋白质子结构的调控则可以为某些复杂构象疾病的致病机理提供宝贵的解答依据。目前,基于偶氮苯化合物对脂质体进行增强释放的常规方法是选择将偶氮苯单元与磷脂分子进行结合,获得改性的“光感磷脂”。该类方法具有较好的控释能力,但是也暴露出了工作流程冗长、复杂繁琐的问题。对此,本文通过纳米团簇的形式为该类问题提供了一个可供参考的解决路线。首先使用了经典的重氮偶合法制备了一种偶氮苯化合物4-[(2,6-Dimethylphenyl)diazenyl]-3,5-dimethylphenol,在内容上通过核磁氢谱、X射线衍射与紫外光谱等手段对其进行了结构性质和光致异构化效应的考察。在进一步将其加热分解为液状物质后,经过滤获得了具有较小粒径和良好光异构化效应的纳米团簇。羟基属于强供电子基团,与带正电荷的胆碱结构具有较好的亲和性质,且羟基与四个甲基的存在可增加偶氮苯同分异构体之间的几何构象差异,这对改变磷脂膜层的渗透性具有一定作用。本工作采用薄膜分散法制备了包载钙黄绿素的光感脂质体,通过多个参数的对比评价了综合效能。此外,本文还采用了紫外光谱、多种荧光光谱、分子对接与分子动力模拟,及圆二色光谱等研究手段,考察了该化合物与重要的食源性alpha-乳白蛋白的互作机理,获得了该偶氮苯化合物的不同异构体将导致与之结合的模型蛋白质结构松散化的结论,并量化了以α-Helix和Coil为主的二级结构的含量比例变化,丰富了偶氮苯化合物作为生物光开关分子的应用广度,同时也为偶氮苯化合物与蛋白质的配体复合物相互作用提供了一定参考。综上,本论文制备得到了一种新型偶氮苯化合物,并基于其光致异构化机制研究了可于光照下实现增强释放的载药脂质体,为光响应纳米脂质体的开发提供了新颖的参考路线;同时使用偶氮苯化合物补充了α-乳白蛋白与可快速光异构化的小分子相互作用的细节,可为潜在的生物分子背景下的光控技术研究提供见解和参考。
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