目的1、探讨USH1G(Usher syndrome type-1G protein)在胃癌组织中的表达及对患者预后的影响;2、揭示USH1G对胃癌迁移及侵袭的作用;3、研究USH1G影响胃癌迁移及侵袭的机制。方法1、通过Western Blot技术检测48例胃癌及相应癌旁组织中USH1G的表达情况,采用生物信息学技术分析TCGA数据库中胃癌病例中USH1G m RNA水平及与患者预后关系;2、通过病毒转染构建USH1G过表达稳定株及干扰稳定株;3、采用划痕、Transwell和细胞粘附实验技术,检测USH1G对胃癌细胞侵袭、迁移和粘附能力的影响;4、通过免疫荧光技术,观察USH1G对胃癌细胞丝状伪足的影响;5、采用实时荧光定量PCR、Western Blot技术以及生物信息学方法分析,确定USH1G对EMT标志物及Rho-ROCK通路相关蛋白的影响;6、通过免疫共沉淀、蛋白质谱和Western Blot技术确定USH1G与MYH9为互作蛋白,并确定互作结构域;7、通过Western Blot技术确定USH1G对MYH9蛋白水平的影响,检测48例胃癌及相应癌旁组织中MYH9的表达情况;8、通过免疫共沉淀技术和Western Blot技术,确定USH1G通过泛素化-蛋白酶体通路下调MYH9蛋白水平;9、通过免疫荧光共定位方法以及Western Blot技术,确定USH1G通过自噬-溶酶体通路下调MYH9蛋白水平。结果1.USH1G在胃癌组织中的表达显著低于良性组织,与患者预后相关;2.USH1G削弱胃癌细胞的迁移、侵袭和粘附能力;3.USH1G减少胃癌细胞丝状伪足形成数量;4.MYH9与USH1G为互作蛋白,且USH1G的SAM结构域为互作结构域;5.USH1G下调胃癌细胞中MYH9蛋白水平,且胃癌组织中MYH9蛋白水平明显高于癌旁组织;6.USH1G通过泛素-蛋白酶体途径下调MYH9蛋白水平;7、USH1G通过自噬-溶酶体途径下调MYH9蛋白水平。结论USH1G在胃癌组织中的表达显著低于良性组织,与患者预后差相关,USH1G削弱胃癌细胞的迁移、侵袭和粘附能力,减少胃癌细胞丝状伪足形成数量,USH1G通过泛素-蛋白酶体途径及自噬-溶酶体途径下调互作蛋白MYH9蛋白水平。