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目的:1.建立高效液相色谱法测定生、炒决明子中橙黄决明素、黄决明素、决明素、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚等6个苷元的含量,并对生、炒决明子饮片进行比较。2.通过柱前衍生化法,建立决明子中葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖等7个单糖的HPLC测定方法,比较生品与炒品中单糖的组成,探究决明子中多糖成分在炮制后发生的变化。3.比较生、炒决明子对刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用。4.比较生、炒决明子对对乙酰氨基酚诱导的小鼠药物性肝损伤的保护作用。5.建立决明子提取物的血清药物化学研究方法,探讨决明子提取物的药效物质基础。材料与方法:1.采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6mm×250 mm,5μm）色谱柱,流速为1.0 mL·min-1。流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈,运行方式为梯度洗脱,检测波长为284 nm,测定6个苷元类成分的含量。2.采用Kromasil C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流速为1.0 mL/min,检测波长为245 nm。流动相为乙腈（A）-水（B）、乙腈（A）-0.1%磷酸水（B）,运行方式为梯度洗脱,分别测定葡萄糖、半乳糖、木糖的含量与甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖的含量。3.采用尾静脉注射刀豆蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤模型。90只小鼠随机分为9组,分别为正常对照组、模型组、阳性药联苯双酯组、生决明子高、中、低剂量组和炒决明子高、中、低剂量组,每组10只。灌胃给药7天,正常对照组与模型组给予等量生理盐水。末次给药1h后,除正常组外,其余各组小鼠尾静脉注射ConA20 mg/kg诱导小鼠免疫性肝损伤,禁食不禁水,8 h后摘眼球取血,检测小鼠血清ALT、AST的含量,肝匀浆MDA、SOD的含量,切片观察肝、肾组织病理学变化。4.采用腹腔注射对乙酰氨基酚诱导小鼠药物性肝损伤模型。90只小鼠随机分为9组,分别为正常对照组、模型组、阳性药联苯双酯组、生决明子高、中、低剂量组和炒决明子高、中、低剂量组,每组10只。灌胃给药7天后,除正常对照组外,其余各组小鼠均采用腹腔注射对乙酰氨基酚400 mg/kg造模。小鼠禁食不禁水,24h后处死取材,检测小鼠血清ALT、AST含量,肝组织GSH-Px、SOD的含量。5.采用血清药物化学研究方法,建立了测定大鼠灌胃决明子后含药血清的高效液相色谱法,通过比较生炒决明子提取物、决明子给药后含药血清及空白血清的异同,找到大鼠口服生、炒决明子后的吸收入血成分。结果:1.橙黄决明素、黄决明素、决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的进样量分别在0.01884-0.1884、0.05760-0.5760、0.01206-0.1206、0.02482-0.2482、0.02112-0.2112μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系;加样回收率（n=6）在97.1%-99.1%,RSD在0.9%-2.6%。2.生、炒决明子中葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖线性范围分别为0.0288-1.15（r=0.9998）、0.0220-0.882（r=0.9997）、0.0258-1.03（r=0.9997）、0.0514-2.05（r=0.9992）、0.0106-0.426（r=0.9996）、0.0314-1.26（r=0.9995）、0.0478-1.19（r=0.9994）;加样回收率（n=5）在98.1%-99.3%,RSD在0.9%-1.7%。3.给予小鼠尾静脉注射ConA后,小鼠血清中ALT、AST水平明显升高,肝细胞变性,肝小叶内局部可见点状坏死,说明造模成功。给予小鼠生、炒决明子预处理均能减轻小鼠肝损伤,显著降低小鼠血清ALT、AST活性。与正常组和联苯双酯组比较,模型组小鼠MDA含量升高,SOD活性降低;与模型组比较,生、炒决明子能降低MDA含量和升高SOD活性,且生、炒决明子高剂量组和联苯双酯组肝脏病理改变明显减轻。4.与正常组比较,对乙酰氨基酚模型组小鼠ALT、AST水平明显升高,肝组织中GSH-Px、SOD活性降低;与对乙酰氨基酚模型组比较,生、炒决明子与联苯双酯均能降低小鼠血清中ALT、AST活性,升高肝组织中GSH-Px、SOD活性（P<0.05）,减轻小鼠药物性肝损伤。5.大鼠灌胃生、炒决明子后,从含药血清中共发现了21个代谢产物,其中4个为大鼠空白血清中存在的内源性物质,8个为决明子提取物中原型吸收入血的成分,包括橙黄决明素、黄决明素、决明素,其余9个成分可能为原型成分在体内的代谢产物。结论:1.炒决明子中六种苷元类成分含量高于生决明子。2.决明子经炮制后单糖含量显著高于生品。3.生、炒决明子对ConA诱导的免疫性肝损伤具有显著的保护作用,炒品优于生品,其高剂量组作用效果与联苯双酯相当,并且在一定范围内显示出剂量依赖性。4.生、炒决明子均能减轻小鼠药物性肝损伤,且降低ALT、AST的活性,生品强于炒品;而升高SOD、GSH-Px的活性时,炒品优于生品。5.应用HPLC快速测定大鼠灌胃决明子提取物后血清中成分,17种入血成分可能是决明子的体内直接作用物质,对其深入研究将为建立决明子谱效关系模型,确定决明子的药效物质与代谢作用机制奠定基础。