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大豆抗原,尤其是大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白,已被公认为动物和人类食物过敏的来源之一。有研究表明,食用大豆抗原会破坏胃肠道内环境,导致微生物结构和功能紊乱、消化能力下降、肠粘膜屏障损伤、呕吐、腹泻等症状,甚至导致死亡,严重威胁人类健康和畜牧业生产效益。同时,也有研究提出一些共生有益菌,如乳酸杆菌和双歧杆菌能有效预防和治疗过敏性疾病。果寡糖作为一种无任何毒副作用的功能性低聚糖,能改善宿主体内双歧杆菌和乳酸杆菌等有益菌的结构和功能,进而影响宿主免疫和屏障系统,并且其在小鼠和人方面有抗过敏的报道,而能否缓解大豆抗原引起的仔猪过敏反应有待进一步研究。在本研究中,我们建立了仔猪致敏模型,通过肠道微生物、相关免疫指标以及肠道屏障指标的检测研究果寡糖对大豆抗原诱导仔猪过敏反应的缓解作用。本试验选取21日龄断奶去势公猪30头,按照体重相近原则随机分为6组,分别为对照组、致敏组、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%FOS缓解致敏组。对照组由酪蛋白提供蛋白源,致敏组和果寡糖缓解致敏组由5%生大豆和30%去皮豆粕提供蛋白源,果寡糖组日粮中包含0.2%、0.4%、0.6%、0.8%FOS分别由致敏组和对照组日粮的沸石代替。致敏组和果寡糖缓解致敏组分别在试验前10天致敏,试验第16-18天、31-32天强化致敏。试验结束时采集血样检测血液免疫指标、细胞因子指标、生化指标和血清内毒素、二胺氧化酶、D乳酸的检测;收集空肠中段、空肠后段、回肠和盲肠内容物并分离出DNA样品,用于16s rRNA基因测序。收集空肠黏膜用于检测紧密连接蛋白的变化情况。第一部分:果寡糖对大豆抗原致敏仔猪生长性能、免疫功能及血液生化指标的影响试验结果表明,致敏组仔猪血清总IgG,总IgE,以及Glycinin特异性IgG和β-conglycinin特异性IgG显著升高,IFN-γ显著降低,IL-4和IL-10显著升高,导致过敏性腹泻升高,生长性能显著下降(P<0.05),血清总蛋白、尿素氮和球蛋白含量也显著高于对照组(P<0.05)。随着不同比例果寡糖的添加,两种特异性IgG、IL-4和IL-10逐渐降低,IFN-γ显著升高(P<0.05),血清总蛋白、尿素氮和球蛋白含量也逐渐恢复正常值,生长性能也随之改善。并且0.6%FOS组效果最佳。第二部分:果寡糖对大豆抗原致敏仔猪肠道微生物及屏障功能的影响在第一部分试验基础上筛选出0.6%FOS组与对照组和致敏组对肠道微生物和屏障功能进行进一步的研究。结果表明,大豆抗原致敏仔猪空肠后段和盲肠的硬壁菌门显著低于对照组,而所有肠段的变形菌门均显著高于对照组(P<0.05)。饲喂果寡糖后的仔猪空肠中段的乳酸杆菌和双歧杆菌丰度显著增加,空肠后段和回肠的变形菌门丰度显著降低(P<0.05)。相关分析表明,部分肠道微生物的丰度与过敏指标存在一定的相关关系,主要表现在致敏组菌群丰度与两种特异性IgG以及IL-4、IL-10相关,其中以变形菌门为主;果寡糖组菌群丰度与IFN-γ、血清总IgG和IgE相关,其中以乳酸杆菌为主。这些结果表明,果寡糖可有效缓解大豆抗原诱导的仔猪过敏反应,这与空肠中段乳酸杆菌和双歧杆菌的增加,以及空肠后段和回肠变形菌门的减少有关。与对照组相比,致敏组紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1含量显著升高,血清内毒素、二胺氧化酶和D-乳酸含量也显著升高,食用果寡糖后得到改善。综上所述,果寡糖可以改善大豆抗原致敏仔猪肠道内微生物结构组成和肠道屏障功能,平衡Th1/TH2细胞因子,降低血清特异性IgG含量,进而提高仔猪的生长性能,降低腹泻率,使过敏反应得到改善,且0.6%FOS组效果最好。