分子标记辅助选择改良油菜核不育系

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油菜是我国第一大油料作物,利用杂种优势是提高油菜产量和稳产性的有效途径。而有效利用油菜杂种优势的关键是获得优良的雄性不育授粉控制系统。本研究旨在利用油菜9012AB核不育资源,通过分子标记辅助选择,回交转育具有高油酸性状和同时具有高油酸抗根肿病性状的隐性核不育授粉控制系统。主要结果如下:1.基于Bnms3和BnA10.Tic40、BnC9.Tic40序列之间的差异,开发了等位基因特异标记M3C9-1F/1R和m3c9-4F/2R。该标记能有效区分Ms3/ms3,但在不同遗传背景下存在一定差异。基于Bnms4~a和Bnms4~b序列之间的差异,开发了共显性标记M4A1-5F/1R;通过对原有SSR标记A7-24和AT3G24240-1的测序序列分析,将其转化为更为简便的琼脂糖水平检测标记。利用C-1F/1R标记和M4A1-1F/b-1R标记,可有效确定ms4~b和ms4~c基因型。基于BnA5.FAD2和BnC5.FAD2、BnA5.fad2开发了BnA5.FAD2的单显性引物x2d-1-1F/1R,并根据序列之间的SNP差异,获得一个共显性的Kasp标记。2.利用油菜6K SNP芯片对118份甘蓝型油菜两型系及临时保持系进行基因分型。聚类分析了它们的遗传相似性,两个高油酸核不育系ZH5和ZS9及其衍生群体与轮回亲本的背景回复率均高于86%;ZH5和ZS9两型系和临时保持系系内遗传相似性高均于90%,其中ZH5和ZS9两型系AB株的遗传相似性分别达到96.8%和95.7%,ZH5和ZS9系统中AC系的遗传相似性分别达到81.3%和88.3%。上述结果为选育遗传相似性高的AC不育系提供了重要信息。3.利用分子标记辅助选择,将Crb基因导入ZH5和ZS9三系高油酸材料中。抗根肿病高油酸核不育材料的轮回亲本背景回复率分别达到83.9%和86.3%,育性表现和高油酸核不育系相似,实现了抗根肿病高油酸ZH5材料的三系配套,ZS9材料可以通过自交下一代实现三系配套。4.对油酸含量和植株育性进行统计观察发现,ZH5系统中低油酸个体的死蕾程度低于高油酸个体;通过遗传连锁分析,两者间基因附近有4个连锁标记有差异,这可能是导致育性差异的原因之一。5.利用分子标记辅助选择,将Ms3位点和ms4位点各等位基因导入到Y2009、15苗15和ZS11来源的优良轮回亲本中,基因型和表型观察表明,Y2009和15苗15群体中不育株死蕾现象明显减轻,表明了遗传背景可能对育性存在较大的影响。通过分子标记辅助选择可加快优良基因聚合育种进程。
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