基于LAMP检测技术的橡胶树白粉病早期测报技术初探

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天然橡胶产业是重要的经济产业。海南省是我国橡胶树重要种植区。橡胶树白粉病是橡胶树重要的叶部病害之一,橡胶树白粉病主要是由专性寄生菌Oidium heveae B.A.Steinmn通过气流传播的。橡胶树白粉病严重危害橡胶树的嫩芽、花序和叶片,严重时导致叶片早脱,割胶延迟,严重影响橡胶树的生长发育和产胶量。橡胶树白粉病发病前期肉眼较难观察到,等全面爆发后很难控制,所以早期预测预报技术对橡胶树白粉病的防治具有重要意义。我们的研究团队已经建立了较为成熟的白粉菌检测技术,即LAMP检测技术。本文在LAMP快速、可视等优势的基础上,初步探索了LAMP技术在橡胶树白粉病早期预测预报中的应用潜能,为实际生产中有效防控橡胶树白粉病提供科学依据。本研究借助甘油通过改变白粉菌孢子细胞壁内外的渗透压达到破壁效果,实现简单粗略的提取橡胶树白粉菌的DNA。通过和常规DNA提取方法经PCR扩增结果显示,本研究建立的简化橡胶树白粉菌DNA提取方法可以提取到白粉菌孢子DNA,经验证可通过LAMP技术检测到。提取不同数量的橡胶树白粉菌孢子DNA,并测量提取DNA浓度。获得一系列成组数据,通过统计分析,建立白粉菌孢子量与DNA提取浓度相关的回归预测数学模型:y= 17.49x + 62.78,R2= 0.884。在室温为25℃的无菌室内定量接种白粉病菌于橡胶树幼嫩叶片,并在后续时间观察、记录开始发病时间(显症时间)、发病情况,获得一系列成组数据,对获得的数据进行统计分析,建立白粉菌孢子量和发病率的回归预测数学模型:y=11.09ln(x)+46.06,R2 = 0.861。在室内模拟林间发病过程,设置温度为温度为25℃,湿度控制在80%,利用便携式孢子捕捉仪捕捉空气中的白粉孢子,提取其DNA,通过已建立的LAMP技术检测提取到的DNA,利用已经建立的回归预测模型预测以后的发病程度与实际发病情况比较相差不大。实现对橡胶树白粉病的早期准确预测。为以后实现田间快速准确测报提供了科学依据,早期和准确的预测对于橡胶树白粉病的有效防控和节省防治成本具有重大的现实意义。
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