CD66c作为B-ALL微小残留病(MRD)标志物的可行性研究

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背景与目的:  急性淋巴细胞白血病是成人及儿童常见的恶性血液系统疾病,其中约85%是急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)。目前随着科学技术的发展,应用大强度的化疗和联合化疗等治疗手段使患者的缓解率得到很大的提高,达到形态学意义上的缓解,但是复发仍然是白血病治疗过程中的最大障碍。其根源在于患者体内残存的白血病细胞,即微小残留病(MRD)的存在。目前,多参数流式细胞术(FCM),以其快速,准确,简便等特点成为监测微小残留病(MRD)最常用的检测方法是。FCM检测MRD的关键点在于选择特异的免疫表型组成合适的抗体组合,能够特异敏感地鉴别正常B系前体细胞与白血病细胞上的免疫标记,并且能够较稳定的表达于患者的治疗前后。为评估患者的预后、进行危险度分层和指导个体化治疗提供重要的参考指标。癌胚抗原相关细胞粘附分子6(Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule6,CEACAM6),也称非特异性交叉反应性抗原(nonspecific crossreacting antigen,NCA)和CD66c,它是免疫球蛋白超家族中的七种人类CEACAM家族成员之一[3].目前为止,对于CD66c与白血病的表达的已有多名学者对此问题展开研究和讨论。Inaba T等[4]指出CD66c在成人及儿童早期B淋巴细胞白血病高表达,Mori等[5,6]发现CD66c与Ph+B淋巴细胞白血病(B-ALL)高度相关,但是各研究组的结论并不一致,而国内尚无系统的研究报道。本研究中,用流式细胞术对包括B-ALL、T-ALL、M0~M7在内的128例初诊白血病患者为研究对象,进行免疫分型检测,分析CD66c在各种白血病初诊患者中的表达特点及差异。用流式细胞术对其中80例完全缓解的白血病患者进行MRD检测,并将CD66c与检测MRD常见指标联合,探讨其作为B-ALL-MRD监测新指标的可行性及临床价值。  资料和方法:  选取郑州大学第一附属医院血液科及儿科初诊的成人及儿童白血病患者128例为实验组,所有病例都经FAB分型和流式细胞术检查明确诊断。其中男性72例,年龄1-79岁,平均年龄32.14±22.88为岁;女性56例,年龄1-82岁,平均年龄37.00±20.03岁。所有病例的诊断均符合张之南等主编的《血液病诊断和疗效标准》第3版,选取CD34/CD7/CD20/CD45、CD10/CD66c/CD19/CD45、CD36/CD64/CD14/CD45、 DR/CD56/CD38/CD45、 CD16/CD13/CD11b/CD45、CD8/CD4/CD3/CD45、 CD58/CD123/CD33/CD45、 CD71/CD235a/CD22/CD4、MPO/CD79a/CD3/CD4、CD/2/CD117/CD15/CD45等多种抗体组合,应用FCM对初诊的各种白血病患者进行免疫分型检测,分析B-ALL患者与其他类型白血病患者中CD66c的表达特点及差异。  选取实验组中化疗完全缓解的白血病患者80例,其中男42例,年龄5-65岁,平均年龄为33.32±14.63,女38例,年龄2-63岁,平均年龄37.05±14.10岁。以CD34/CD117/CD33/CD45、CD36/CD64/CD14/CD45、CD34/CD19/CD20/CD45、CD10/66c/CD38/CD45、CD34/CD7/CD3/CD45, CD2/CD66c/CD38/CD45等抗体组合检测患者MRD。分析CD66c在完全缓解的白血病患者化疗前后表达的差异。  结果:  1.结果显示初诊白血病患者中,急性淋巴细胞白血病(ALL)患者CD66c的表达强度高于急性髓系白血病(AML)患者,急性淋巴细胞白血病(ALL)中B-ALL患者CD66c表达强度高于T-ALL患者。  2.CD66c在B-ALL患者骨髓细胞表面表达稳定,在一定时间内对MRD检测具有较高的准确性,可以作为B-ALL诊断和MRD检测的指标,丰富了MRD检测的抗体组合。  3.CD66c与BCR-ABL融合基因相结合,可提高B-ALL的诊断和MRD检测的准确性。  结论:  1.在初诊白血病患者中,CD66c在B-ALL白血病患者骨髓细胞上表达强度高于其他类型白血病。  2.CD66c在B-ALL细胞表面表达稳定,在一定时间内对MRD检测具有较高的准确性,可以作为B-ALL诊断和MRD检测的指标。  3. CD66c可与BCR/ABL融合基因相结合提高B-ALL的诊断和MRD检测的准确性。
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