量子点标记活细胞内GLUT4的研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jinlu2010
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葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)在细胞摄取葡萄糖分子的过程中扮演着重要角色。弄清GLUT4转运过程的动力学特性不仅可以为一些疾病的治疗(如糖尿病)带来一定的启示和理论指导,还可以阐述一些生命现象。量子点是近年来应用到生命科学领域的一种新型荧光探针。由于其具有吸收谱宽,发射谱窄,发射光更强且稳定性较高等独特的优势,量子点在生命科学研究领域得到广泛应用。论文以L6细胞为研究对象,结合宽场荧光显微成像技术,全内反射荧光显微技术,共聚焦荧光显微技术等平台,利用免疫学方法将量子点特异性绑定在目标蛋白GLUT4上。论文首先描述了用量子点标记固定细胞的实验方法探索,验证了免疫学方法标记的可行性;接着,论文探讨了在活细胞状态下不同标记方法的优、缺点及其适用条件,为后续进行生物学意义的研究奠定了坚实的基础;最后,论文选择了在4℃条件下用IgG-Qdots标记活细胞GLUT4分子的方法,结合绿色荧光蛋白标记技术和MATLAB分析工具,分别从全细胞水平和单微粒水平对GLUT4囊泡的转运进行了初步的动力学特性分析。根据实验得出的数据结合其他研究者的结论,本文使用的量子点标记方法对GLUT4囊泡正常生理活动的转运过程影响有限,这表明此标记方法可以进一步应用到研究GLUT4囊泡转运的详细机制中。此外,该方法也为量子点标记在生物学领域的其他应用提供了一定的参考依据。
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