目的:用Aβ_1-42寡聚体和Aβ_1-40单体两者混合物处理内皮细胞（hCMEC/D3）,观察其对Aβ跨血脑屏障转运受体的影响并探讨1,25（OH）₂D₃对这种影响的保护作用。方法:（1）永生化人脑微血管内皮细胞体外培养并采用免疫细胞化学进行鉴定。（2）Aβ_1-40和Aβ_1-42肽溶液的制备,采用Western-Blot对Aβ_1-42寡聚体进行鉴定。（3）MTT实验分别测定不同浓度Aβ_1-40单体、Aβ_1-42寡聚体、Aβ混合物以及1,25（OH）₂D₃对细胞的毒性作用,寻找Aβ制剂的亚毒性浓度以及筛选1,25（OH）₂D₃最佳药物浓度。（4）实验分组:（1）对照组:正常永生化人脑微血管内皮细胞;（2）Aβ混合物组:亚毒性浓度的Aβ_1-40+Aβ_1-42;（3）Aβ混合物+1,25（OH）₂D₃干预组:分别用Aβ混合物+低剂量1,25（OH）₂D₃、Aβ混合物+中剂量1,25（OH）₂D₃、Aβ混合物+高剂量1,25（OH）₂D₃处理细胞。（5）分别采用RT-PCR、Western-Blot检测各组低密度脂蛋白受体相关蛋白-1（LRPl）、P-糖蛋白（P-gp）、晚期糖基化终末产物受体蛋白（RAGE）mRNA及蛋白水平的表达变化。结果:（1）经Western-Blot检测,显示本研究制备获得Aβ_1-42寡聚体,且分子量以8-12kDa为主。（2）经MTT实验测定,选取细胞存活率在90%以上的Aβ制剂亚毒性浓度即Aβ_1-42（25nM）+Aβ_1-40（100nM）;确定1,25（OH）₂D₃的最佳实验药物浓度为lnM,10nM,50nM。（3）Aβ混合物组RAGE mRNA及蛋白表达水平较对照组显著升高（P<0.01）,1,25（OH）₂D₃低、中、高剂量干预组RAGE mRNA及蛋白表达水平均较Aβ混合物组下调（P<0.01）;Aβ混合物组LRP1 mRNA及蛋白表达水平较对照组无统计学差异（P>0.05）,1,25（OH）₂D₃低、中、高剂量干预组LRP1 mRNA及蛋白表达水平均较未添加1,25（OH）₂D₃的Aβ混合物组上调（P<0.01）;Aβ混合物组P-gp mRNA及蛋白表达水平较对照组下调（P<0.01）,1,25（OH）₂D₃低、中、高剂量干预组P-gp mRNA及蛋白表达与Aβ混合物组比较无统计学差异（P>0.05）。结论:（1）可溶性Aβ混合物可调节血脑屏障内皮细胞上其自身转运受体RAGE、P-gp的表达,其结果可引发Aβ在脑中进一步累积。（2）1,25（OH）₂D₃可通过调节RAGE、LRP1转运受体的表达,可降低脑内Aβ水平而发挥其保护作用,1,25（OH）₂D₃可作为潜在的治疗或预防阿尔茨海默病的方法。