肝星状细胞在肝纤维化中的作用及磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂对其增殖影响的实验研究

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该文参考高春芳等的不连续密度梯度离心法并作改良,建立了一种经济、简便、可靠的分离大鼠HSC的方法.旨在探讨Wortamnnin对大鼠HSC增殖的影响.方法:用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠HSC,并进行体外培养.光镜及电镜下动态观察细胞学改变,并以MTT比色法观察Wortamnnin对HSC增殖的影响,用流式细胞仪检测HSC的DNA含量的改变.结果:分离培养的HSC经台盼蓝拒染实验活细胞大于98﹪,细胞得率约为3.95×10<7>个/肝脏,细胞纯度为97﹪以上;Wortamnnin对HSC增殖有明显抑制作用,呈药物浓度依赖关系;并可抑制HSC的DNA合成.结论:Wortamnnin在体外具有抗肝纤维化作用,它对于防治肝纤维化可能有一定的临床意义和应用前景;而且该方法的建立为进一步研究HSC与肝纤维化的关系,尤其是细胞水平及分子生物学水平的研究奠定了基础.
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