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霍山石斛是兰科石斛属草本植物,也是我国传统石斛中药材中的珍稀品种,具有抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤和治疗白内障等药理活性。肿瘤疾病是目前危害人体生命安全且致死率较高的全球性疾病。化学药物治疗是临床上治疗肿瘤疾病和防止肿瘤疾病恶化的重要手段之一。但化疗药物对癌细胞不具有特异性,在干扰肿瘤细胞生长增殖的同时也严重损伤生长活跃的机体细胞,并直接损伤心、肝、肾和神经系统等功能。目前已有研究报道霍山石斛具有肝脏保护和调节免疫的药理作用,但对于霍山石斛对于化疗药物引起的肝损伤和免疫抑制的减毒作用尚无文献报道。因此,本研究以霍山石斛为研究对象,利用化疗代表药物环磷酰胺建立肝损伤和免疫抑制模型分别考察霍山石斛的保肝活性和免疫调节作用,评估霍山石斛对环磷酰胺所致毒性的减毒作用,为合理应用霍山石斛提供实验依据。此外,本课题还研究了霍山石斛对细胞色素P450酶亚型CYP1A1、CYP1A2和CYP2B酶活性的影响,为霍山石斛临床安全用药提供参考依据。实验研究的主要结果如下:1.霍山石斛对环磷酰胺所致肝损伤的保护作用利用临床常用化疗药物环磷酰胺建立了C57BL/6小鼠肝损伤模型,评价霍山石斛的保肝作用。结果发现,霍山石斛能降低由环磷酰胺引起的小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的升高及丙二醛(MDA)含量的过量表达,并提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,缓解肝脏组织病理性损伤。结果表明霍山石斛能缓解因CPA引起的小鼠肝脏损伤,起到一定的保肝作用。2.霍山石斛对环磷酰胺所致的免疫抑制的影响通过腹腔注射环磷酰胺建立小鼠免疫损伤模型,评估霍山石斛的免疫调节作用。实验结果发现,霍山石斛能增加由注射环磷酰胺导致的小鼠溶血素水平、碳粒廓清指数、DTH耳肿胀度与细胞因子IL-2、IL-6和TNF-αmRNA表达的降低。另外,口服霍山石斛后,免疫功能低下的小鼠的体重和外周血白细胞、红细胞、血红蛋白和淋巴细胞百分率计数均有一定程度升高。结果表明,霍山石斛对机体的免疫功能有良好的调节作用,对于由环磷酰胺导致的免疫功能受损有一定的保护作用,该作用可能与霍山石斛调节了参与免疫调节的相关通路的细胞因子有关。3.霍山石斛对小鼠肝脏CYP450酶活性的影响采用特异性探针底物法评估霍山石斛对CYP1A2、CYP1A1和CYP2B酶活性的影响。实验分析了口服霍山石斛组与空白组小鼠肝微粒体分别对CYP1A2、CYP2B和CYP1A1酶的特征底物非那西丁、安非他酮和乙氧基异吩噁唑酮体外代谢的作用,发现霍山石斛能够显著诱导CYP1A2酶的活性,对CYP2B及CYP1A1酶的活性没有显著性影响。因此,霍山石斛在临床使用时,应重视其诱导CYP1A2酶的作用,避免霍山石斛与CYP1A2酶参与代谢的临床药物在联合使用时影响该药物合理药效的发挥;而将其作为保健药物长期服用对于人体没有不良作用。综上所述,霍山石斛可作为长期服用的保健类药物,联合环磷酰胺共同使用,能保护由环磷酰胺引起的肝损伤和免疫功能损伤。