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背景代谢异常是恶性肿瘤重要并发症,是恶性肿瘤治疗困难、预后不佳的原因之一。改善代谢异常是提高患者生存质量的治疗关键。魏品康教授提出肿瘤“痰污染”假说,认为代谢异常的物质基础是痰。现代研究已证实肿瘤蛋白质代谢异常与炎性因子有关。我科以“消痰散结”为法则,创立消痰散结方应用于恶性肿瘤的临床治疗,取得了令人满意的疗效。因此,本实验通过观察消痰散结方对荷瘤大鼠炎性因子表达的调节作用,探讨消痰散结方调整恶性肿瘤蛋白质代谢异常的可能机制。目的通过建立Wistar大鼠皮下移植Walker256瘤模型,构建恶性肿瘤痰污染环境,运用ELISA、EnVision、实时PCR等方法,检测消痰散结方对痰浊中TNF-α、IL-6等炎性因子蛋白和mRNA表达的调控作用,探讨消痰散结方调整恶性肿瘤蛋白质代谢异常的作用机制,佐证肿瘤痰证理论的科学性以及肿瘤代谢异常的痰污染环境“痰浊”的物质存在性。方法30只Wistar大鼠,随机分为正常对照组、空白组、消痰散结方组；除正常对照组外,其余各组为荷瘤大鼠,皮下接种Walker256瘤,建立大鼠蛋白质代谢异常模型。24h后消痰散结方组灌胃给药(2ml／天,×4w)；正常对照组、空白组大鼠同期、同条件下一般饮食饲养；观察实验动物体重变化；第4周实验结束时,麻醉解剖所有动物,心脏取血后检测血清总蛋白、白蛋白水平,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6表达。取胫骨前肌组织、肝组织行Envision、实时PCR等方法检测其中TNF-αIL-6、NF-Kb、泛素等的蛋白和mRNA表达。结果1.成功建立大鼠Walker256皮下移植瘤模型。移植术后7天左右可在皮下触及较硬肿块,后肿块逐渐增大。荷瘤鼠逐渐出现皮毛干枯、少食、消瘦、倦怠乏力、行动迟缓等衰竭症状。HE染色证实荷瘤鼠骨骼肌结构紊乱。2.荷瘤鼠因肿瘤而影响机体的正常生长,造模7天后各荷瘤鼠组体重增加值低于正常组(P<0.05)；造模21天后消痰散结方组体重增加值高于空白组(P<0.05)而低于正常对照组(P<0.05)。3.消痰散结方对血清总蛋白和白蛋白的影响：与正常组相比,空白组、消痰散结方组总蛋白未见明显降低(P>0.05)；各荷瘤鼠组白蛋白均较正常组有所下降(P<0.05),消痰散结方组高于空白组(P<0.05)。4.消痰散结方对血清TNF-α蛋白表达的影响：各荷瘤鼠组血清中TNF-α蛋白表达均较正常对照组明显升高(P<0.05)；消痰散结方组血清TNF-α蛋白明显低于空白组(P<0.05)消痰散结方对血清IL-6蛋白表达的影响：各荷瘤鼠组血清中IL-6蛋白表达均较正常对照组明显升高(P<0.05)；消痰散结方组血清IL-6蛋白明显低于空白组(P<0.05)。5.消痰散结方对肌肉组织TNF-α蛋白表达的影响：各荷瘤鼠组肌肉组织中TNF-a蛋白表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组与空白组未见明显统计学差异(P>0.05)。消痰散结方对肌肉组织TNF-αmRNA表达的影响：各荷瘤鼠组肌肉组织中TNF-αmRNA表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组与空白组未见明显统计学差异(P>0.05)。消痰散结方对肝脏组织TNF-α蛋白表达的影响：各荷瘤鼠组肝脏组织中TNF-α蛋白表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组低于空白组(P<0.05)。消痰散结方对肝脏组织TNF-αmRNA表达的影响：各荷瘤鼠组肝脏组织中TNF-αmRNA表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组低于空白组(P<0.05)6.消痰散结方对肌肉组织IL-6蛋白表达的影响：各荷瘤鼠组肌肉组织中IL-6蛋白表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组与空白组差异无统计学意义(P>0.05)消痰散结方对肌肉组织IL-6 mRNA表达的影响：各荷瘤鼠组肌肉组织中IL-6 mRNA表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组与空白组差异无统计学意义(P>0.05)消痰散结方对肝脏组织IL-6蛋白表达的影响：各荷瘤鼠组肝脏组织中TNF-α蛋白表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组低于空白组(P<0.05)。消痰散结方对肝脏组织IL-6 mRNA表达的影响：各荷瘤鼠组肝脏组织中TNF-a mRNA表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组低于空白组(P<0.05)。7.消痰散结方对肌肉组织NF-Kb蛋白表达的影响：各荷瘤鼠组肌肉组织中NF-Kb蛋白表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组与空白组差异无统计学意义(P>0.05)消痰散结方对肌肉组织NF-Kb mRNA表达的影响：各荷瘤鼠组肌肉组织中NF-Kb mRNA表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组与空白组差异无统计学意义(P>0.05)。8.消痰散结方对肌肉组织泛素蛋白表达的影响：各荷瘤鼠组肌肉组织中泛素蛋白表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组低于空白组(P<0.05)。消痰散结方对肌肉组织泛素mRNA表达的影响：各荷瘤鼠组肌肉组织中泛素mRNA表达较正常对照组均明显升高(P<0.05)；消痰散结方组低于空白组(P<0.05)。结论1.建立的大鼠Walker256皮下移植瘤模型,制作方法简单,成瘤率高,具有与临床恶性肿瘤代谢异常类似的表现。2.消痰散结方可提高荷瘤大鼠的体重及血清白蛋白水平。3.荷瘤鼠血清、肌肉组织、肝脏组织中rNF-α、IL-6等炎性因子表达升高,证实炎性因子与肿瘤蛋白质代谢异常密切相关,4.消痰散结方可下调荷瘤大鼠肝脏组织中TNF-α、IL-6等炎性因子的表达,调控肝脏的蛋白合成,下调荷瘤大鼠肌肉组织中泛素的表达,调控骨骼肌ATP-泛素蛋白酶体途径,是其清化肿瘤痰污染环境,改善肿瘤代谢异常的可能机制之一。同时证明了肿瘤痰污染假说的科学性、“痰”的物质存在性。