过氧化氢和谷胱甘肽对Ⅰ型与Ⅱ型子宫内膜癌细胞生长的影响

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目的比较Ⅰ型(KLE细胞)和Ⅱ型(HEC-1-b细胞)子宫内膜癌细胞对氧化应激的抵抗能力以及还原型谷胱甘肽(GSH)对Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞生长的影响并探讨其机制。方法①用H2O2、GSH分别处理Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞,噻唑蓝(MTT)法检测两型细胞的增殖水平。②取细胞增殖比在80%左右时的H2O2、GSH浓度分别处理Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞后,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶标仪检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性。结果①在不进行处理的情况下,Ⅰ型子宫内膜癌细胞较Ⅱ型子宫内膜癌细胞ROS水平及CAT活性较低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GPx活性较高(P<0.01)。②MTT实验显示,H2O2明显抑制Ⅰ型子宫内膜癌细胞的生长,而对Ⅱ型子宫内膜癌细胞的生长影响不明显;GSH能够十分明显地抑制Ⅱ型子宫内膜癌细胞的生长,而对Ⅰ型子宫内膜癌细胞的生长则有一定的促进作用。③在氧化应激条件下,Ⅰ型子宫内膜癌细胞GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD和CAT活性降低(P<0.01);Ⅱ型子宫内膜癌细胞GSH、GSSG水平明显升高,GSH/GSSG比值略有升高,SOD、CAT和GPx活性升高(P<0.01)。④用GSH处理后,Ⅰ型子宫内膜癌细胞生长加快,细胞内ROS和GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD、CAT和GPx活性降低(P<0.01);Ⅱ型子宫内膜癌细胞生长被抑制,细胞内ROS,GSH及GSSG水平下降,GSH/GSSG比值明显升高,CAT和GPx活性降低(P<0.01)。结论①Ⅰ型子宫内膜癌细胞较Ⅱ型子宫内膜癌细胞ROS水平及CAT活性较低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GPx活性较高。②两型细胞对氧化还原剂表现出十分不同的应答。H2O2对两型细胞生长均有抑制作用,但对Ⅰ型子宫内膜癌细胞生长的抑制作用更显著;GSH在一定的浓度水平促进Ⅰ型子宫内膜癌细胞生长,但可抑制Ⅱ型子宫内膜癌细胞生长。③Ⅰ型子宫内膜癌细胞内谷胱甘肽抗氧化系统及抗氧化酶系统不能有效的对抗氧化应激,细胞对外界的氧化刺激较敏感,容易受到氧化损伤而死亡;外源性GSH可降低Ⅰ型细胞内的氧化应激水平,对其生长有一定的促进作用。④Ⅱ型子宫内膜癌细胞内谷胱甘肽抗氧化系统及抗氧化酶系统对外源性氧化还原刺激表现为较为有效的应答,细胞有较强的抗氧化能力,不易被氧化损伤。
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