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目的:1.通过针刺慢性轻度不可预测刺激(CUMS)大鼠上星、人中穴,观察各组大鼠行为学表现及脑组织中ERK1/2、p-ERK1/2、CREB、p-CREB、BDNF蛋白含量表达的影响及相关分子机制研究。2.通过针刺CUMS大鼠上星、人中穴,分析各组大鼠粪便中微生物的丰富度以及多样性,探讨CUMS组、针刺穴位组及针刺非穴组大鼠肠道微生物丰富度及多样性之间的变化。方法:将72只SPF级雄性SD大鼠,随机分为空白组、CUMS组、针刺穴位组、针刺非穴位组、空白穴位组、空白非穴组六组,每组12只。第一组为正常组:不进行造模及治疗,共饲养7周;第二组为模型组:共造模7周;第三组为针刺穴位组:在造模第4周后进行针刺上星、人中穴,共针刺3周,并在针刺前一小时进行造模刺激;第四组为针刺非穴组:在造模第4周后进行针刺大鼠非穴位,共针刺3周,并在针刺前一小时进行造模刺激;第五组为正常针刺穴位组:不造模,从第4周开始针刺大鼠上星、人中穴,共3周;第六组正常针刺非穴组:不造模,从第4周开始针刺大鼠非穴位,共3周。在第50天进行行为学测试。行为学结束后,取大鼠海马组织及粪便,采用蛋白质印迹法检测海马中BDNF、ERK1/2、p-ERK1/2、CREB、p-CREB蛋白的表达量。通过16Sr DNA测序分析对各组大鼠粪便中16Sr RNA菌种丰富度的变化进行分析比较。结果:1.与正常组对比:CUMS组大鼠体重、旷场实验、高架十字迷宫等行为学指标显著小于正常组大鼠(P<0.01);正常穴位组与正常非穴组则无统计学差异(P>0.05)。与CUMS组对比:针刺穴位组大鼠行为学等指标有明显改变(P<0.01)。针刺非穴组大鼠行为学等指标改变不明显(P>0.05)。2.与正常组对比:CUMS组大鼠海马ERK1/2、CREB蛋白含量均无明显统计学差异(P>0.05),而BDNF、p-ERK1/2、p-CREB含量显著降低,具有统计学差异(P<0.01);正常穴位组与正常非穴组则无统计学差异(P>0.05)。与CUMS组相比:针刺穴位组大鼠海马ERK1/2、CREB蛋白含量均无明显统计学差异(P>0.05),而BDNF、p-ERK1/2、p-CREB含量升高,差异具有统计学意义(P<0.01);针刺非穴组大鼠海马中蛋白含量均改变不明显(P>0.05)。3.与正常组对比:CUMS组大鼠肠道菌群在门、纲、目、科、属各分类学水平与正常组大鼠比较,大部分存在明显差异(P<0.05)。与CUMS组对比:针刺穴位组大鼠肠道菌群丰富度指数明显与CUMS组存在差异(P<0.01);针刺穴位组大鼠肠道丰富度指数与CUMS组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:1.针刺CUMS大鼠人中、上星穴具有改善抑郁样行为的作用,能逆转大鼠行为学差异,其作用机制有可能通过BNDF-ERK-CREB信号通路产生作用。2.针刺CUMS大鼠人中、上星穴后,明显观察到针刺穴位组大鼠肠道微生物与CUMS组大鼠肠道微生物中多样性及丰富度显著增加,其作用机制可能与菌群-肠-脑轴相关。