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Sica等于2003年发现B7-H4分子,B7-H4的mRNA广泛表达于人的外周组织中,B7-H4蛋白在多种肿瘤组织中表达,包括肺癌、卵巢癌、胃癌等,且被认为是一种肿瘤标志物,与肿瘤的发生发展紧密关联。在以往研究中,利用免疫组化染色技术、Western blotting技术,以及高密度的肿瘤组织芯片技术,系统性地检测了不同肿瘤组织中B7-H4分子的表达水平,发现在非小细胞肺癌、肾细胞癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌等恶性肿瘤组织中均检测到B7-H4分子的高表达,并且通过与临床资料做关联性分析发现,B7-H4分子在这些肿瘤组织中的表达水平与患者的病理分级、临床分期、肿瘤大小等密切相关。目前,B7-H4受体尚未被克隆出来。B7-H4-Fc融合蛋白能够与B7-H4受体结合,行使B7-H4分子的生理功能。本科室已经利用B7-H4-Fc融合蛋白通过流式检测发现B7-H4受体在扁桃体组织和肺癌浸润T细胞上表达。本研究利用B7-H4-mFc融合蛋白通过免疫组化实验检测肺腺癌患者癌组织及癌旁组织中B7-H4受体的表达情况,并与患者临床病理参数进行关联性分析。一、建立利用B7-H4-mFc融合蛋白的免疫组化方法检测扁桃体组织、肺癌组织、癌旁组织中B7-H4受体的表达【目的】建立利用B7-H4-mFc融合蛋白的免疫组化方法检测B7-H4受体在扁桃体组织、肺癌组织、癌旁组织石蜡切片中的表达情况,确定B7-H4-mFc融合蛋白的最适反应浓度,为下面肺腺癌组织芯片实验做准备。【方法】制备扁桃体组织、肺癌组织、癌旁组织石蜡切片,通过免疫组化实验检测B7-H4受体的表达。【结果】组化染色结果显示,在扁桃体组织、肺癌组织、癌旁组织石蜡切片中均有不同程度的棕色显示,且B7-H4-mFc融合蛋白浓度为2.5ug/ml时,染色结果最好,胞核阳性染色为均匀清晰的棕黄色,苏木素染色为明亮的蓝紫色,染色境界分明,背景干净,基本无非特异性染色。【结论】B7-H4受体在扁桃体组织、肺癌组织、癌旁组织中均有不同程度的表达,且主要定位在细胞核中。二、利用B7-H4-mFc融合蛋白检测B7-H4受体在肺腺癌组织芯片中的表达及其与临床指标的关联性分析【目的】利用B7-H4-mFc融合蛋白检测肺腺癌患者癌组织及癌旁组织中B7-H4受体的表达情况,并与病人临床病理参数进行关联性分析。【方法】通过免疫组化实验,利用B7-H4-mFc融合蛋白检测75例肺腺癌患者癌组织及癌旁组织中B7-H4受体的表达情况,并通过染色强度和染色阳性率指标对结果计分,并与患者临床病理资料进行关联性分析,经过SPSS软件统计分析结果。【结果】75例肺腺癌患者癌组织及癌旁组织中B7-H4受体的表达按染色强度和染色阳性率指标计分分为不同等级。B7-H4受体在肺腺癌组织中的表达高于癌旁组织;B7-H4受体在癌旁组织中不同程度的表达没有显著差异,与患者预后没有明显相关性;B7-H4受体在肺腺癌中的表达与患者生存率相关性的分析表明:B7-H4受体在肺腺癌中的表达越高,患者总生存率越低,预后越差;肿瘤大小、T分期、N分期和临床分期均与肺腺癌患者的生存期显著相关,性别、年龄、病理分级均与肺腺癌患者的生存期无显著关联;肿瘤大小、T分期、N分期和临床分期都不是肺腺癌的独立预后指标。【结论】B7-H4受体在肺腺癌中的表达可以考虑作为一种负向预后指标。实验仍需扩大样本量,进一步分析B7-H4受体在癌组织中的表达与患者预后的关系,为临床应用提供依据。