论文部分内容阅读
前言: MicroRNA(miRNA)是一类广泛分布于真核生物的非编码小分子单链RNA,通过与靶mRNA碱基对特异结合,引起靶mRNA降解或翻译抑制,调控基因转录后的表达。近年来揭示miRNA-129是一个典型的多功能基因,是潜在的致癌或抑癌基因,有其下游基因介导参与多种生理病理变化,在多种肿瘤的发生发展中具有重要作用。因此,miRNA的研究对于揭示肿瘤基因的表达、肿瘤疾病的治疗以及预防具有重要意义。因此,miRNA的研究对于揭示肿瘤基因的表达、肿瘤疾病的治疗以及预防具有重要意义。本研究主要探讨miRNA-129-2在喉癌组织中表达是否有差异,并分析异常表达与年龄、性别、吸烟史、TNM分期和临床分级的相关性,进一步研究miRNA-129-2对喉癌细胞增殖及凋亡能力的影响。 材料与方法: 本研究采用荧光实时定量RT-PCR的方法,检测80例喉癌原发灶组织及其相应的癌旁正常喉粘膜组织中miRNA-129-2表达水平,以人喉鳞癌Hep2细胞系为研究对象,将Hep2细胞分为转染mir-129-2模拟物(mir-129 mimics)的实验组,转染NC的Hep2细胞为对照组;应用荧光实时定量RT-PCR检测两组Hep2中mir-129-2的含量;采用CCK8、transwell细胞迁移、流式细胞术实验方法观察mir-129-2对Hep2细胞增殖、迁移及凋亡水平的影响。 结果: 1、荧光实时定量RT-PCR结果显示:喉癌组织中miRNA-129-2的表达量明显低于在癌旁正常组织中的表达量,差异有统计学意义。 2、瞬时转染Hep2细胞后,荧光实时定量RT-PCR结果显示:miR-129-2在未转染的Hep2细胞(对照组)和转染miR-129-2模拟物的喉癌Hep-2细胞(实验组)的表达比值有统计学意义(P<0.05)。 3、CCK8检测细胞增殖情况,结果显示:各时间点实验组Hep2细胞的存活数与对照组相比存在明显差异,有统计学意义(P<0.05)。 4、transwell细胞迁移结果显示:miRNA-129-2可以显著地抑制Hep2细胞系的迁移(P<0.05)。 5、流式细胞术结果:miRNA-129-2对喉癌Hep2细胞系的凋亡能力无明显影响(P>0.05)。 结论: miRNA-129-2在喉癌组织中的表达显著低于癌旁组织,miRNA-129-2过表达后喉癌细胞系增殖、迁移等恶性生物学行为能力明显减弱,另外发现miRNA-129-2对喉鳞癌Hep2细胞系的凋亡能力无明显影响。这为研究和治疗喉癌提供了新的思路。