【摘 要】
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本试验探讨了采样方法对乳成分值的影响以及季节、胎次和泌乳期等因素对中国荷斯坦奶牛泌乳性能的影响,并测定分析奶牛空腹血糖、甘油三脂、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度
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本试验探讨了采样方法对乳成分值的影响以及季节、胎次和泌乳期等因素对中国荷斯坦奶牛泌乳性能的影响,并测定分析奶牛空腹血糖、甘油三脂、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白等生化指标值与乳成分值相关性;应用DNA池筛选LOX-1基因单核苷酸突变(SNP)位点,通过高分辨率溶解曲线结合测序分析SNP与泌乳性能的相关性;探讨了基因启动子区域是否存在甲基化调控基因的表达;获得奶牛乳汁体细胞总RNA,克隆基因全长编码区序列,并利用LOX-1和β-actin检测以及比较其在不同个体间的表达情况,为奶牛的遗传育种提供参考依据。取得主要研究结果如下:1、采样方法极显著影响乳成分值(P<0.01);季节、泌乳期和胎次均极显著影响奶牛的泌乳量、乳脂率、乳蛋白率和乳糖值(P<0.01)。奶牛305d泌乳量与乳脂率、乳蛋白率呈极显著负相关;乳脂量与乳蛋白量与305d泌乳量呈显著正相关;奶牛血清的低密度脂蛋白与乳脂率间的相关系数极显著,表明血液中低密度脂蛋白含量与奶牛乳脂含量值密切相关。2、经检测内含子4上双碱基突变10839/10840 (TG/CA)表现低度多态(PIC分别为0.200,0.238)其余多态位点表现为中度多态(PIC>0.25),且未达到Hardy-Weinberg平衡(P<0.05)。外显子34927T→G、5132 C→T使编码氨基酸由苯丙氨酸、苏氨酸变为缬氨酸和异亮氨酸。5’非编码区、外显子3等8个突变位点多态性显著影响奶牛泌乳性能。5’非编码区没有检测出甲基化,其对泌乳性能影响是否与甲基化调控有关还有待进一步研究。3、建立乳汁体细胞提取RNA和检测基因表达的方法。试验结果表明牛奶中的体细胞含量丰富,活力能够达到提取RNA要求;从体细胞提取的RNA完整性、纯度可以用来合成cDNA, LOX-1基因编码区全长序列810 bp扩增正确。不同泌乳量、乳脂率个体奶牛LOX-1的表达量有显著差异,可初步推测LOX-1基因参与奶牛脂肪代谢调控。
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