产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens),又称魏氏梭菌(Clostridium welchii),是一种梭状芽孢菌属条件性致病菌,在自然界分布非常广,可引起各种动物坏死性肠炎、肠毒血症,同时也是人畜创伤性气性坏疽及人类食物中毒的主要病原菌之一,该菌的致病因子是其所产生的外毒素。到目前为止,已发现的外毒素有12种(α、β、γ、η、δ、ε、ι、θ、κ、λ、μ和ν)之多,但起主要致病作用的毒素只有4种,即α、β、ε和ι,根据这4种主要致死性毒素与其抗毒素的中和试验,可将该菌分为A、B、C、D、E5个毒素型。本研究通过使用多重PCR对覆盖全国范围的14个省、市、自治区蛋鸡场样品进行检测了解全国各地养鸡场中产气荚膜梭菌流行状况，获取不同地区产气荚膜梭菌主要流行的毒素型，为后期疾病流行及调查备份重要资料。并通过与某公司的合作，了解恩拉霉素对产气荚膜梭菌的抑制特点，给药物的研发提供重要数据。本研究分为三个部分：规模化蛋鸡场产气荚膜梭菌的分离：通过从山东、河北、北京等覆盖全国的14省、市、自治区的31个规模化蛋鸡场进行粪便和肠道样品的采样对规模化蛋鸡场鸡群进行产气荚膜梭菌的流行现状普查，共采集390份新鲜粪便和肠道样品，选取疑似菌落进行纯化培养，按常规方法进行生化实验初步鉴定共分离得到产气荚膜梭菌40株，检出率为10.26%，低于国外相关报道的分离率。产气荚膜梭菌毒素型分析：参照已发表文献对α、β、ε、ι、β2和肠毒素六种毒素根据三步PCR检测体系分别对cpa、cpb2、etx、iap的四基因进行multi一PCR，及cpb和cpe的单基因PCR检测。最终得到其中一株扩增出196bp和325bp两条条带其余均只有325bp一条条带，因此得到只有一株C型菌其余39株均为A型菌。通过对产气荚膜梭菌毒素型的分析可以了解各地产气荚膜梭菌分布，为流行病学调查和诊断提供了重要依据。恩拉霉素对比抑菌实验：本实验主要使用某公司生产的恩拉霉素产品与同种产品不同批次生产的产品进行比较，对产气荚膜梭菌进行药敏实验，从而获得恩拉鼎对产气荚膜梭菌的抑菌特点，并通过不同时期产品进行对比，确定试验结果。通过实验得出恩拉鼎从0.01μg/ml便可以对产气荚膜梭菌进行较强的抑制，当达到0.1ug/ml浓度以后抑菌效果会出现降低现象，0.5ug/ml以后随着药物浓度增大抑菌效果重新增强，在实验室条件下呈现一个曲线抑菌效果，经过使用某公司提供的恩拉鼎与不同批次产品在实验室条件下对产气荚膜梭菌抑菌能力和特点基本相同，这为该产品的实际应用和进一步研发提供了重要数据。