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Presenilin-1(PS-1)基因突变是引起早发性家族性常染色体显性遗传性阿尔茨海默病(EOFAD)的主要原因之一。研究表明PS-1基因突变可以导致APP的异常裂解，使有害的Aβ42生成增多；并可以增强细胞对凋亡诱导因子的敏感性。现有的资料，无论是形态学还是相关的功能研究结果均已证实，阿尔茨海默病(AD)的发病主要累及胆碱能神经元。以胆碱能神经元作为靶细胞研究AD的发病机制及相关的诊断、治疗措施得到人们的公认。然而，目前在体外分离、纯化培养神经元依然面临许多困难，因此，寻找一种替代途径成为人们研究的又一个重点。本课题利用全反式维甲酸(RA)作为诱导剂，体外诱导PC12细胞，运用MTT法、免疫细胞化学、免疫荧光染色、流式细胞仪、放射酶学和TUNEL法等方法，通过观察形态学、细胞生长曲线和生长周期、胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性变化及细胞凋亡的情况，研究不同浓度RA诱导PC12细胞呈现拟胆碱能神经元表型的情况，探讨RA诱导PC12细胞呈现拟胆碱能神经元表型的最佳条件，为体外研究AD的发病提供细胞模型；同时，利用基因工程技术，将野生型(WT)和突变型PS-1基因L286V转染诱导的拟胆碱能神经元，观察突变型PS-1基因L286V对拟胆碱能神经元形态、细胞生长曲线、生长周期、ChAT和AchE活性的变化，以及细胞凋亡的影响，探讨PS-1基因突变引起细胞形态和功能改变的可能机制。主要结果如下：<WP=7>1、1 ~ 20μmol/L浓度RA均明显增加ChAT活性，以10μmol/L浓度时ChAT活性最高，超过该浓度后ChAT活性呈下降趋势。RA对AchE活性无显著影响；2、当浓度大于10μmol/L后RA诱导PC12细胞凋亡的作用明显增强；3、1 ~ 50μmol/L浓度RA均能抑制PC12细胞增殖，RA浓度越高，抑制作用越明显。RA对细胞周期的抑制作用主要表现于G1→S期；4、PS-1突变型L286V基因具有抑制RA诱导PC12细胞增殖的作用，表现在G1期细胞增多，S期细胞减少，细胞增殖指数降低；5、PS-1野生型和突变型L286V基因具有抑制ChAT的表达和活性的作用，其中L286V的抑制作用更为明显。而L286V基因尚具有抑制AchE的表达及其活性的作用；6、在有或无血清培养条件下，PS-1突变型L286V均具有促进细胞凋亡的作用，但在无血清条件时，这种促进作用表现得极为明显。本研究结果表明RA具有诱导PC12细胞呈现拟胆碱能神经元表型的作用，利用适当浓度的RA诱导产生的拟胆碱能神经元可以作为胆碱能神经元的替代细胞用于某些AD的实验研究。10μmol/L是诱导的最佳浓度。PS-1突变型L286V对RA诱导的PC12细胞具有生长抑制作用，使细胞生长阻滞于G1期；同时能够抑制细胞ChAT和AchE的表达，降低ChAT和AchE的活性；在有或无血清培养条件下，均能促进细胞凋亡，以无血清培养时表现更为明显。