SERS活性脂质体复合药物载体的构建及其与肿瘤细胞相互作用研究

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脂质体复合药物载体可以同时实现药物在肿瘤细胞中的持续递送、载体在细胞内分布的实时监控和协同治疗,这使得脂质体复合药物载体成为肿瘤诊断和治疗一体化研究的新热点。本论文提出了一种SERS活性脂质体-金属复合药物载体,该药物载体可利用表面增强拉曼光谱(SERS)作为脂质体的示踪信号,并将其应用于载体在肿瘤细胞内的药物可控释放及载体与细胞相互作用的研究,为实现基于脂质体-金属复合药物载体的肿瘤诊疗打下了技术基础。本论文的主要创新性研究成果如下:(1)设计制备了一种SERS活性的脂质体复合药物载体。首先,以金纳米颗粒为SERS基底,在其表面标记拉曼分子并修饰聚合物,得到功能化的金纳米颗粒;然后,在脂质体表面上吸附功能化金纳米颗粒,构建了脂质体-金属复合药物载体,并对其SERS特性进行研究;最后,将制备的SERS活性脂质体复合药物载体与细胞共培养,并对其细胞内SERS特性进行评估。实验结果表明,用SERS信号可以对复合药物载体在肿瘤细胞内的分布进行监测。(2)研究了脂质体-金属复合药物载体与肿瘤细胞间的相互作用。实验中,在银纳米颗粒表面标记拉曼分子并吸附到酸敏感脂质体的表面,构建了新型的复合药物载体;将制备的SERS活性脂质体复合药物载体与肿瘤细胞共培养,并对复合药物载体与肿瘤细胞之间的相互作用进行监测。实验结果表明,该药物载体进入细胞后分布在酸性的溶酶体中并发生药物释放;药物分子扩散出溶酶体,布满整个细胞质。采用SERS光谱有效避免了与药物荧光光谱的重叠,实现了对载体和药物分子在肿瘤细胞内的动态分布的同时示踪,为完善药物载体和细胞间的相互作用与细胞内高效释药提供了实验依据。(3)研究了金属纳米颗粒对脂质体的入胞途径和细胞内转运过程的影响。在实验过程中,先借助拉曼标记分子MMTAA作为偶联温度敏感脂质体和金核银壳纳米颗粒的偶联剂,制备了基于脂质体-金核银壳纳米颗粒的复合药物载体;再利用SERS信号对复合药物载体的入胞途径和细胞内转运过程进行监测。实验结果表明,该复合药物载体的细胞行为与空白脂质体类似,主要通过网格蛋白介导的内吞方式进入细胞并滞留在溶酶体中。此外,脂质体也不会影响金核银壳纳米颗粒的SERS特性和光热特性。该研究揭示了脂质体-金属复合药物载体能够进行模块化的设计,有望为肿瘤的诊疗一体化提供一个全新的思路。
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