人类细小病毒B19于1975年由Cossart首次发现于英国献血员中。它是目前仅有的两种可以感染人的细小病毒，在全世界广泛分布。它可感染各个年龄段的人群，并引起多种不同症状。在世界众多地方，许多育龄妇女都是B19病毒的易感人群。如果怀孕期间感染该病毒，则可能会导致严重的贫血、NIFH、胎儿损伤、胎儿死亡等一系列症状。B19病毒的检测方法有电镜观察，B19抗原酶联免疫，血细胞凝集测定等，目前常用的是直接杂交和PCR法。 本文中，我们运用比普通单轮PCR更灵敏的巢式PCR方法检测了共1700个血清样本的DNA，包括从湖北省妇幼保健院采集的900个妇女及孩章血液样本以及从武汉市第六医院采集的800例成年人（男女均有）血液样本。第一组（妇女组）的阳性检测率为8.33％，第二组（普通成人，包括男性和女性）为4.50％。结果显示，育龄妇女的B19感染率远高于普通人群，很有必要对孕妇进行诊断从而预防新生儿感染B19病毒。 B19病毒基因组全长约5.6kb，编码一个非结构蛋白NS1，以及两个组成病毒衣壳的结构蛋白：VP1（84kDa）和VP2（58kDa），除了VP1的N-末端多了由227个氨基酸组成的VP1独特区外，其余部分两者完全一致。最近对大约30种不同的细小病毒研究发现，VP1蛋白的N-末端独特区有一个保守的结构模型（HDXXY），并且具有磷脂酶A2活性，同样的现象也在细小病毒B19中发现。磷脂酶A2已经成为抗体药物设计的一个潜在靶标。因此，对细小病毒B19独特区的研究具有重要意义，目前国内该方面的研究很少。 本实验中，通过定点突变改变VP1蛋白独特区的关键氨基酸，检测其磷脂酶活性是否改变，从而研究该病毒独特区的功能。本文将独特区序列（VP1u）插入到PUC-18a载体中，重组质粒PUC-uVP1经PCR扩增得到突变体克隆，测序确认后，再将包含有突变位点的独特区构建到表达载体pMal-c2x中，获得重组克隆pMal-uVP1。运用此方法，顺利突变了其中的133，153，174这三个关键氨基酸。然后在大肠杆菌中表达其蛋白，用WB检测，通过扩大培养诱导表达，并且过柱纯化，收集目的蛋白。下一步实验将进一步纯化、切割蛋白，测其磷脂酶活性。