【摘 要】
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该文以糖皮质激素受体基因为对象,着手建立基因剔除小鼠实验系统,并对相关技术进行了探讨.该文从获得糖皮质激素受体基因的基因组DNA入手,筛选了小鼠的基因组文库,得到了6个
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该文以糖皮质激素受体基因为对象,着手建立基因剔除小鼠实验系统,并对相关技术进行了探讨.该文从获得糖皮质激素受体基因的基因组DNA入手,筛选了小鼠的基因组文库,得到了6个阳性克隆,克隆了糖皮质激素受体基因的基因组DNA,对该基因区域的结构进行了精细分析,在充分验证了各片段的位置和长度后,亚克隆了用于构建基因剔除载体的同源片段,构建了组成型和诱导型基因剔除载体.建立了小鼠胚胎干细胞的培养系统,以及胚胎干细胞的转染和药物的筛选体系,得到了组成型和诱导型基因缺陷的抗性细胞克隆,通过Southern Blot鉴定,获得了9个组成型GR基因缺陷的胚胎干细胞系,为进一步获得嵌合体小鼠奠定了基础.该文的最后是两篇综述,一篇是可用于转基因动物的基因诱导表达系统;另一篇是关于人胚胎干细胞的几个问题.文章中对目前的这两个热点问题进行了讨论.
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