本研究采用重组慢病毒为载体，感染小鼠造血干细胞，然后将其移植到经同位素辐射破坏自身造血功能的NOD/SCID鼠中，以期提高hFIX在动物模型的表达水平和持续时间，为今后临床试验打下基础。 　　在本项研究中，作者采用由Ubiquitin(泛素)启动子调控的GFP(绿色荧光蛋白)基因和人凝血因子IX基因的重组慢病毒载体FUGW、FUXW。通过磷酸钙三质粒共转染的方法制备出高滴度的重组慢病毒。 　　感染FUGW慢病毒的293T、Vero、Hela细胞72h后均可观察到荧光。重组FUXW慢病毒通过尾静脉注射入血友病B小鼠，表达最高峰值为30.7ng/mL,表达持续超过49天。 　　分离小鼠骨髓中单个有核细胞，体外培养并感染重组FUGW和FUXW慢病毒，一周后流式测得GFP阳性率12.1％，hFIX表达量为41.7±4.2ng/ml(ICR鼠)和34.5±6.5ng/ml(C57鼠)。通过免疫磁珠法(MACS)进一步分离小鼠造血干细胞lin-c-kit+，添加细胞因子短暂体外培养并感染重组FUGW和FUXW慢病毒，一周后测得GFP阳性率为25.1％(加细胞因子)和16.6％(不加细胞因子)，hFIX表达量为46.6±5.7ng/ml(加细胞因子)和33.3±4.8ng/ml(不加细胞因子)。 　　感染重组FUGW和FUXW慢病毒的造血干细胞经尾静脉移植到经60Co亚致死剂量辐射的NOD-SCID鼠中。前者移植后6-8周处死，分离外周、骨髓和脾脏细胞，观察GFP在造血干细胞及其分化子代细胞中的表达；后者移植后一周开始检测外周血中hFIX表达量，第一周存活两只NOD-SCID鼠的表达量为37.3ng/ml和52.5ng/ml。