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目的:观察电针对创伤性颅脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)大鼠神经功能、脑组织病理改变、细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C)和Caspase-9蛋白表达的影响,从凋亡蛋白Cyt-C和Caspase-9来研究电针促进神经功能恢复、减少脑细胞凋亡及治疗颅脑损伤的可能机制。方法:选用Feeney’s自由落体打击法制备大鼠中度颅脑损伤模型,将70只SD大鼠随机分为空白组(8只)、假手术组(8只)、模型组(24只)和电针组(24只),选取大鼠水沟(GV26)、百会(GV20)、内关(PC6)、足三里(ST36)穴位采用电针治疗,于造模后每天上午对电针组大鼠治疗,1次/天,为期14天。其余各组无干预。于第3天、7天和14天共三个时间点采用改良的神经功能缺损评分(Modified Neurological Severity Score,mNSS)评估各组大鼠神经功能;模型组与电针组于第3天、7天和14天三个时间点各处死8只大鼠并采集标本,空白组与假手术组于第14天各处死8只大鼠并采集标本。应用HE染色和尼氏染色观察各组大鼠损伤脑组织的形态学变化;采用原位末端标记法(TdT-mediated nick end labeling,TUNEL)检测损伤脑组织的细胞凋亡情况;采用免疫组化、Western blot检测损伤部位皮层Cyt-C、Caspase-9的蛋白表达情况。结果:⑴mNSS评分:造模后模型组与电针组各时间点得分显著高于空白组或假手术组,具有统计学意义(P<0.01),模型组与电针组得分第3天达到峰值,随时间推移均呈下降趋势且电针组趋势更为显著,电针组3天、7天、14天的得分均低于模型组,具有统计学意义(P<0.05);⑵HE染色:病理切片中,大体观察空白组与假手术组细胞胞体饱满,核膜明晰;模型组第3天可明显观察到损伤区域周围大量组织坏死,细胞排列散乱、空泡样改变、变形,核破碎、固缩等,但电针组较模型组坏死范围更小,在第7天、14天切片中模型组与电针组均可见较多细胞核固缩及新生的结缔组织,但电针组的受损及修复情况较模型组更好。⑶尼氏染色:镜下观察到空白组与假手术组尼氏小体分布较为均匀,无明显神经元丢失。造模后第3天模型组与电针组损伤部位周边细胞尼氏小体数量明显减少,随后随时间推移逐渐回升,电针组3天、7天、14天的尼氏小体数量均高于同时间点模型组。⑷TUNEL:空白组与假手术组中仅有个别的凋亡神经细胞。造模后3天,模型组与电针组大鼠的神经细胞凋亡数量均有明显升高,第7天至14天两组凋亡数均呈下降趋势,模型组与电针组的神经细胞凋亡数于14天均显著高于假手术组或空白组(P<0.01),但电针组的神经细胞凋亡数于3天、7天、14天明显低于同时间点模型组(P<0.05)。⑸免疫组化、Western blot测定Cyt-C、Caspase-9蛋白表达:在模型组与电针组中第3天达到了各自的峰值,随时间推移均呈下降趋势,这相似于神经细胞凋亡的变化情况。模型组与电针组Cyt-C的表达量在伤后14天均高于假手术组或空白组(P<0.01),但电针组Cyt-C的表达量在伤后3天、7天、14天均少于同时间点模型组(P<0.05);Caspase-9的表达量变化趋势与Cyt-C基本一致,电针组Caspase-9的表达量在伤后3天、7天、14天均少于同时间点模型组(P<0.05)。结论:⑴电针可以起到改善TBI大鼠神经功能的作用;⑵电针可以降低TBI大鼠受损脑组织区域的神经细胞凋亡水平;⑶电针可能是通过调节Cyt-C、Caspase-9的表达来减少受损脑组织的细胞凋亡,从而起到促进TBI后神经功能康复的作用。