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第一章纳米羟基磷灰石/聚酰胺66复合材料前交叉韧带重建腱-骨界面栓的制备及生物学评价目的：研究制备出一种新型纳米羟基磷灰石(nanohydroxyapatite, nHA)/聚酰胺66(Polyamide66, PA66)支架材料腱-骨界面栓,并进行各项体内及体外生物学特性检测,探讨其作为组织工程支架的可行性。方法：支架制备：采用相转移法制备nHA/PA66支架材料；结构观察：观察支架大体外观,并将制备好的支架切面进行扫描电子显微镜观察；生物相容性检测：应用骨髓间充质干细胞与nHA/PA66复合材料的体外联合培养、鉴定,急性全身毒性试验,皮内刺激反应试验,肌肉植入试验等方法测定nHA/PA66复合材料的生物学性能。结果：扫描电子显微镜观察nHA/PA66复合材料的孔径大小符合设计要求；nHA/PA66复合材料对矿化诱导培养的第三代BMSCs的增殖和分化为成骨细胞的表征没有影响；试验动物未见急性毒性表现及皮内刺激反应；植入肌肉内的nHA/PA66支架材料没有引起炎症反应,并逐步降解,16周时已基本降解完全,并被骨替代。结论：本实验设计制备nHA/PA66复合材料的方法简单,各项性能参数易于控制,具有三维多孔结构,孔径分布在200-500μm范围内,符合骨组织工程的应用要求；支架与BMSCs的生物相容性良好,有利于BMSCs吸附、增殖,在骨修复过程中表现出良好的骨诱导活性；全身毒性试验,皮内刺激试验及肌肉相容性试验结果表明,nHA/PA66复合材料具有良好的生物相容性和体内成骨性能,是组织工程修复骨缺损的理想支架材料。第二章富含血小板血浆的制备及检测目的：本实验采用两步离心法制备富含血小板血浆(Platelet-rich Plasm, PRP),并对血小板源生长因子(Platelet-derived growth factor, PDGF)进行检测,以期取得符合要求的PRP,为将来临床广泛应用提供理论支持。方法：PRP制备：无菌状态下于兔耳中央动脉取自体血10ml后进行离心处理；第一次离心后血液分为两层,吸取上层的血浆层至另一离心管,第二次离心后血浆分为两层,保留下层的即为PRP；进行PRP及全血中的血小板计数并PDGF活性测试。结果：10ml自体血可制备1.5mlPRP;全血中血小板的浓度为393.4×109/l, PRP中血小板的浓度为1751.3×109/l,PRP中血小板浓度为全血中血小板浓度的4.46倍；全血中PDGF浓度测定结果为34.21ng/ml;PRP中PDGF浓度测定结果为142.75ng/ml,PRP中PDGF浓度为全血中的4.17倍。结论：PRP中含有对ACL重建后腱-骨愈合有利的生长因子；二次离心法是制备PRP简便有效的方法。第三章PRP/nHA/PA66复合材料对自体半腱肌腱前交叉韧带重建后腱-骨愈合的影响的动物实验目的：本实验将支架材料nHA/PA66及PRP二者结合在一起观察对前交叉韧带(Anterior Cruciate Ligament, ACL) ACL重建后腱-骨愈合的影响效果,为将来组织工程技术能够在ACL重建手术中的广泛应用提供理论基础。方法：健康成年的新西兰大白兔60只,按实验设计分为A、B、C三组,A组胫骨隧道入口不予任何处理；B组肌腱移植物离远端约5mm处用缝线扎一肌腱环,其内置入5mmx2mmx2mm大小nHA/PA66复合物；C组肌腱移植物的肌腱环内置入滴入了PRP的5mmx2mmx2mm大小nHA/PA66的复合材料。每组2W、4W、8W、16W按时间点分别处死5只模型兔用于大体标本观察、CT扫描及三维重建、生物力学测试以及组织学观察,将各项参数与正常关节参数比较,并以此评估腱-骨界面的愈合情况。结果：1.生物力学试验：2W时各组间最大载荷无明显差异(P>0.05),4W、8W时各组间最大载荷呈现C>B>A有统计学意义(P<0.05)；16W时最大载荷C>A (P<0.05)、B>A(P<0.05),但C、B两组间无统计学差异(P>0.05)。2.CT扫描及三维重建：2W时A、B、C三组间CT值均无明显差异(P>0.05);4W、8W时A、B、C三组EA的CT值比较均表现出C>B>A (P<0.05);16W时A、B、C三组EA处的CT值比较C>A、B>A (PO.05),而C、B两组之间无明显差异(P>0.05)。3.组织学切片：C组软骨细胞、“潮线”及止点结构出现及成熟B、A组早且好。结论：PRP含有能促进ACL重建后的腱-骨愈合的生长因子；PRP/nHA/PA66复合材料有较好的生物相容性及成骨诱导活性；通过免疫组化染色检测PDGF、BMP-2这两种生长因子是测成骨情况有效方法；PRP/nHA/PA66复合材料可以促进ACL重建后的腱-骨愈合,是韧带组织工程中一种新型的生物活性材料。